Wnt/β-catenin信号通路与TPA诱导的毛囊干细胞异常活化关系的实验研究

摘要

毛囊干细胞周期性的活化与静息，是毛囊正常周期性生长的基础。毛囊干细胞在一些物理、化学因素作用下，可发生持续的激活，出现活化异常，这将引发毛囊干细胞耗竭或皮肤新生物的形成。Wnt/β-catenin信号通路在毛囊干细胞正常活化过程中起着关键的作用，但目前对于该信号通路在毛囊干细胞异常活化中的作用及与诱发毛囊干细胞异常活化的因素间的关系所知甚少。肿瘤促进剂TPA能诱导毛囊干细胞的异常活化，联合DMBA处理后，可进一步促进皮肤新生物的形成。本文检测了TPA单独及联合DMBA处理的皮肤中Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达，分析了阻断Wnt/B-catenin信号通路后，TPA诱导的毛囊干细胞异常活化的变化情况，以求证实Wnt/β-catenin信号通路参与了TPA诱导毛囊干细胞异常活化的过程，TPA能通过激活Wnt/β-catenin信号通路，诱导毛囊干细胞的异常活化。
　　 目的
　　 通过分析TPA单独及联合DMBA处理的皮肤中Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达，及阻断Wnt/β-catenin信号通路后，TPA诱导的毛囊干细胞异常活化的变化情况，探讨Wnt/β-catenin信号通路在毛囊干细胞异常活化中的作用及与诱发毛囊干细胞异常活化的因素间的关系。
　　 方法
　　 1、本研究利用TPA处理7周大小的雌性小鼠背部皮肤1、2、4周后，HE染色检测毛囊形态的变化、免疫荧光技术检测毛囊干细胞标记物表达及增殖情况、RT-PCR、Western blot以及免疫荧光技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键分子的表达。在TPA处理4周的小鼠背部皮肤上分别注射DKK1质粒和N1质粒，HE染色和免疫荧光技术检测Wnt/β-catenin通路被抑制后TPA诱导的毛囊的形态学变化、毛囊干细胞标记物表达及增殖情况。
　　 2、本研究还进一步利用HE染色以及免疫荧光技术检测了DMBA/TPA长期处理小鼠背部皮肤后皮脂腺样新生物的形态学变化、皮脂腺样新生物的分化特征、毛囊干细胞的活性以及Wnt/β-catenin信号通路的变化。
　　 结果
　　 1、进一步验证了TPA处理后毛囊干细胞被活化，促使静止期的毛囊提前提前进入生长期：2、首次发现了TPA处理毛囊角质形成细胞后Wnt/β-catenin信号通路的关键分子表达上调；3、在TPA处理的小鼠背部皮肤内靶向抑制Wnt/β-catenin信号通路后，毛囊干细胞的异常活化受到抑制，毛囊延迟进入生长期；4、在DMBA/TPA诱导的皮脂腺样新生物内发现毛囊分化的特异性分子的表达；5、发现了毛囊干细胞的存在，并且处于活化状态；6、Wnt/β-catenin信号通路的关键分子在皮脂腺样新生物内处于上调状态。
　　 结论
　　 1、Wnt/β-catenin信号通路为TPA诱导毛囊干细胞异常活化的过程所必需。2、Wnt/β-catenin信号通路的关键性分子和毛囊干细胞参与了DMBA/TPA诱导的皮脂腺样新生物的发生发展。

目录

文摘

英文文摘

英文缩写一览表

前 言

第一部分 Wnt/β-catenin信号通路参与了TPA诱导的毛囊干细胞的异常活化

引言

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分 Wnt/β-catenin信号通路关键分子以及毛囊干细胞参与DMBA/TPA诱导的皮脂腺样新生物的发生发展

引言

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

全文总结

致谢

参考文献

文献综述 Wnt/β-catenin信号通路与毛囊干细胞活化的关系

参考文献

攻读硕士期间发表文章