皮屑、汗液中钠钾离子浓度的检测及其相关因素分析

摘要

肥胖已成为当今社会影响人类健康的重大慢性疾病。肥胖尤其是腹型肥胖,是冠心病、高血压、肾功能不全发生、发展的主要危险因素。肥胖引发高血压的机制除饮食不合理、生活不规律以外,其代谢改变更是发病的重要方面。文献报道在盐摄入过量时,皮肤组织间隙可将游离钠以结合状态非活性钠的形式储存起来,而非活性钠的储存能力降低可能导致高血压的发生。检测皮肤组织间隙的钠含量可用以评估全身钠的含量或长期钠的摄入量。众所周知,盐的摄入量与高血压关系密切。高血压患者会出现钠水潴留、低钾血症等临床表现。作为高血压重要发病基础,肥胖患者皮肤钠钾含量及其代谢情况目前还并不十分清楚。
　　钠、钾离子的排泄是通过相应受体的作用而实现的,这其中包括糖皮质激素受体(GR)、醛固酮受体(MR)、以及钠-钾-ATP酶。但皮肤存在哪些钠钾离子的转运蛋白目前还尚不清楚。皮肤除通过皮屑排泄钠钾之外,汗液更是其主要的排泄途径。汗液是人体调节体温和排出毒素的主要形式,同时是人体除尿液之外的第二大排盐方式。汗液中钠离子的浓度随出汗速度的加快而增加,两者呈线性关系。汗液中盐浓度的增加与出汗率的提高是一致的,因此提高出汗率是排出体内多余盐的主要方式。
　　目前,皮肤间隙钠含量测定主要包括灰烬法和核磁共振法,而钾含量测定主要是微透析法。但这些测定方法都因可操作性差和价格昂贵等原因未广泛应用于临床研究。本文通过建立检测人体皮屑中钠、钾离子浓度的方法,研究皮屑中钠、钾水平以反映组织钠、钾的变化,并进一步分析其与肥胖的关系,为探索肥胖性高血压的病理生理机制提供依据。通过对皮肤组织蛋白的提取分析与钠钾转运相关相应蛋白的表达。试图通过对饮食中嗜辣和非嗜辣人群汗液的分析探讨辣椒与钠、钾排泄的关系。
　　一、对象与方法
　　1、研究对象
　　2012年在重庆地区招募主城区居民,签署知情同意书,共计纳入127例受试者。其中女性75例,男性52例,年龄53±6岁。根据中国肥胖诊断标准,按体重指数将受试者分为健康组50例,BMI是22±1Kg/m2;超重组56例,BMI是26±1Kg/m2;肥胖组21例,BMI是30±2Kg/m2。根据腰围将受试者分为健康组81例,腰围77±6cm;腹型肥胖组46例,腰围93±6cm。
　　排除糖尿病、周围神经病变、皮肤病、使用利尿剂或阿托品等影响排汗药物者。
　　其中第二部分研究对象亦为重庆地区社区人群,共计纳入98例受试者。其中女性61例,男性37例,平均年龄52±6岁。根据日常饮食情况分为普食组(n=53例)和嗜辣组(n=45例)。
　　排除标准:
　　1.继发性高血压。
　　2.已经发生心脑血管并发症的患者,包括脑血管病、心肌梗死、心绞痛、冠状动脉血运重建、充血性心力衰竭、肾功能受损。
　　3.过敏性皮肤和患有皮肤病者。
　　2、研究方法与检测指标
　　第一部分研究中,所有受试人群测量血压、身高、体重、WC、臀围,并计算BMI。在次晨空腹(至少8小时无热量摄入)状态下抽取静脉血测血糖。皮屑采集具体方法见实验步骤,溶解皮屑样本后取样测定钠钾离子浓度。分别取C57BL/6J小鼠皮肤和健康成年人眼睑皮肤组织,提取组织总蛋白,采用蛋白免疫印迹法检测GR、MR、Na+-K+-ATP蛋白表达。
　　第二部分研究中,所有受试人群测量血压、身高、体重、WC、臀围,并计算BMI。受试者在测试当日清晨开始留取尿液标本,完整留取24h尿液标本,记录尿液总量,并于次日清晨送检。尿液标本检测钠、钾离子浓度和肌酐。采集汗液、收集24h尿液,测定其中钠钾离子浓度。
　　二、结果
　　(一)第一部分结果
　　1.本研究建立了应用火焰原子分光光度计检测皮屑钠、钾离子浓度的方法:该方法的回收率为93.1％~107.2%,达到仪器测量要求;相对标准偏差(RSD)均小于5%,在允许范围内。所以该方法具有较高的可信度和准确度。
　　2.按照BMI分组时,肥胖组皮屑钠、钾离子浓度含量均显著高于正常组(P<0.01)和超重组(P<0.01),而超重组和正常组比较无差异(P>0.05)。
　　3.按照WC分组时,腹型肥胖组和健康组比较皮屑钠、钾离子浓度检测均无统计学差异。
　　4.综合BMI和WC指标进行分组,皮屑钠、钾离子浓度检测在WC正常并BMI正常、WC升高并BMI升高、WC正常并BMI升高3组间无统计学差异。
　　5.皮屑钠离子浓度与BMI、WC有具有正相关性(P<0.05),而与血压无相关性。皮屑钾离子浓度与BMI正性相关(P<0.05),与WC和血压无相关性。
　　6.C57BL/6J小鼠和人的皮肤组织中有糖皮质激素受体、醛固酮受体、Na+-K+-ATP酶3种蛋白的表达。
　　(二)第二部分结果
　　1.汗液钠离子浓度:嗜辣组汗液钠排出量高于均值的人数明显多于普食组(P<0.01),而低于均值的人数明显少于普食组(P<0.01)。
　　2.汗液中钾离子浓度:普食组与嗜辣组钾排出量无明显差异。
　　3.尿液钠离子浓度:普食组尿液钠浓度均值是186.9mmol/L,嗜辣组尿液钠浓度均值是237.6mmol/L,嗜辣组明显高于普食组(P<0.01)。
　　4.尿液钾离子浓度:普食组尿液钾浓度均值是47.60mmol/L,嗜辣组尿液钾浓度均值是46.52mmol/L,两组间尿液钾浓度无差异。
　　三、结论
　　1.肥胖患者皮屑中钠、钾离子浓度升高。
　　2.嗜辣人群汗液及尿液中钠排泄量增加,而钾排泄量不变。
　　3.皮肤组织中有GR、MR、Na+-K+-ATP酶等钠、钾离子转运相关蛋白的表达。

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缩略语表

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第一章 前言

第二章 肥胖患者皮屑钠钾离子浓度检测

2.1 研究对象与方法

2.1.1 研究对象

2.1.2. 研究方法

2.1.3 统计学分析

2.2 结果

2.2.1 皮屑钠、钾离子测定方法的建立

2.2.2 不同分组肥胖患者皮屑钠、钾离子浓度的变化

2.2.3 C57BL/6J小鼠和人皮肤钠钾转运相关蛋白的表达

2.3 讨论

第三章 膳食辣椒与汗液中钠、钾浓度关系

3.1 研究对象与方法

3.1.1 研究对象

3.1.2 研究方法

3.1.3 统计学分析

3.2 结果

3.2.1 受试者一般情况

3.2.2 膳食辣椒对汗液及尿液钠钾排泄的影响

3.3 讨论

全文结论

参考文献

文献综述皮肤组织间隙钠的研究进展及其与血压的关系

参考文献

攻读硕士学位期间发表论文

致谢