硼酸消毒液促进糖尿病难愈性创面愈合的护理效用及相关机制初探

摘要

背景和目的:
　　糖尿病难愈性创面是包括糖尿病足和其他糖尿病创面在内的,由多种原因引起的经久不愈的创面,是最严重、花费最高的糖尿病慢性并发症之一,严重的糖尿病足可导致截肢、甚至死亡。调查显示,我国约有30％的非创伤性截肢是由于糖尿病足引发。糖尿病难愈性创面发生发展机制及护理是临床研究的难点和热点。
　　TGF-β1/Smads信号转导通路是糖尿病难愈性创面修复中重要的信号转导通路之一。TGF-β1是介导组织硬化和间质纤维化的关键细胞因子,参与了细胞分化、增殖、粘附、血管生成、炎症反应和创面愈合等过程,还能促成成纤维细胞的迁移和增殖,趋化、刺激成纤维细胞生成细胞外基质。研究显示,糖尿病难愈性创面的形成与创面TGF-β1表达的绝对或相对不足有关。近年,弱酸环境对难愈性创面的愈合有促进作用的临床个案已有少量报道。我们认为其机制除了弱酸环境对创面微生物有一定的抑制作用外,还可能与其能刺激创面Tgf-β1 mRNA的表达有关,这可能是其促进创面愈合的重要机制之一,值得深入研究。
　　4%硼酸溶液作为临床常见的消毒剂,具有弱酸性和较低的细胞毒性,多用于皮肤、粘膜及伤口的消毒处置,有部分临床研究也曾运用硼酸对下肢浅表溃疡、褥疮等创面进行处理并取得了较好效果。本研究因此进行了硼酸消毒液促进糖尿病难愈性创面愈合的护理效用及其相关机制的实验研究,以期为临床糖尿病难愈性创面护理措施的细化和修订提供更科学的参考依据。
　　材料与方法:
　　1.动物分组与模型建立:8周龄雄性C57BL/6小鼠30只,购买并饲养于第三军医大学实验动物中心SPF级动物实验室,随机分为糖尿病组与正常对照组,各15只。每组中又分为3天、7天、14天三个时相点(每个时相点5只)。糖尿病组小鼠以链脲佐菌素诱导建模,角膜环钻制作小鼠背部创面。
　　2.每日1次,在同一时段分别以0.9%生理盐水(A处理)、4%硼酸溶液(B处理)、0.5%碘伏+3%过氧化氢溶液(C处理)对不同组别小鼠创面进行清洗换药,观察记录创面结痂情况、愈合情况及创面大小,并拍照。
　　3.在不同时相点用 Trizol提取小鼠创面组织的总 RNA,在检测 RNA浓度、RT-PCR反应后,获得cDNA。
　　4.采用SYBR Green Q-PCR法对上述创面组织的cDNA进行Tgf-β1、Smad4、Collagen I的mRNA相对表达量检测。
　　结果:
　　1.硼酸对创面愈合率的影响
　　糖尿病硼酸处理组各时相点创面愈合率较其余处理组的创面愈合率提高明显(P<0.05)。
　　2.硼酸对创面Tgf-β1 mRNA表达的影响
　　正常小鼠硼酸处理组3天时Tgf-β1 mRNA的表达均较其余处理组明显增高(P<0.05);糖尿病小鼠硼酸处理组在伤后3天、14天时其Tgf-β1 mRNA的表达较其余处理组有显著升高(P<0.01)。
　　3.硼酸对创面Smad4 mRNA表达的影响
　　正常小鼠硼酸处理组伤后14天时其 Smad4 mRNA表达低于其余处理组(P<0.05);糖尿病小鼠伤后14天生理盐水组Smad4 mRNA的表达明显低于碘伏+双氧水处理组(P<0.05)。
　　4.硼酸对创面Collagen I mRNA表达的影响
　　糖尿病小鼠和正常小鼠在伤后3天时均表现为硼酸处理组和碘伏+双氧水处理组的Collagen I mRNA的表达高于生理盐水组(P<0.05);14天时,糖尿病小鼠硼酸组和生理盐水组Collagen I mRNA的表达高于碘伏+双氧水处理组(P<0.05),正常小鼠则是碘伏+双氧水组Collagen I mRNA表达高于生理盐水和硼酸组。
　　结论:
　　1.不管在早期还是中晚期,硼酸处理对提高糖尿病小鼠伤口愈合率,促进创面愈合均达到了很好的效果;
　　2.硼酸促进糖尿病小鼠创面愈合的作用机制可能与其特殊的酸性条件能更好地刺激创面Tgf-β1、Collagen I mRNAs的表达有关;
　　3.正常小鼠早期使用硼酸和生理盐水都能较好地促进创面愈合,晚期使用碘伏+双氧水对促进创面愈合效果更好。

目录

封面

声明

目录

缩略语表

英文摘要

中文摘要

第一章 前 言

1.1 选题依据

1.2 研究背景

1.3 研究内容、方法及意义

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学处理

第三章 结 果

3.1 糖尿病建模效果检测

3.2 糖尿病小鼠与正常小鼠创面愈合效果比较

3.3 糖尿病小鼠各处理组间Tgf-β1、Smad4、Collagen I mRNA表达的比较

3.4 正常小鼠各处理组间Tgf-β1、Smad4、Collagen I mRNAs表达的比较

3.5 糖尿病小鼠与正常对照组小鼠Tgf-β1、Smad4、Collagen I mRNA表

第四章 讨 论

4.1 硼酸营造弱酸性环境对糖尿病难愈性创面微环境的影响

4.2 TGF-β1/Smads信号转导通路在创面愈合中的作用

4.3 硼酸促进伤口愈合的临床效果观察

4.4 小结

全文总结

创新与不足

参考文献

参考文献

攻读学位期间研究成果

致谢