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广东万年青的鉴别与药理活性的初步研究

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引言

第一章 文献综述

1.1 万年青的研究现状

1.2 中药指纹图谱的研究现状

1.3 接触性皮炎的研究现状

第二章 广东万年青中成分的测试

2.1 仪器与试药

2.2 供试品溶液的制备

2.3 结果与讨论

3.1 仪器与试药

3.2 方法与结果

3.3 方法学考察

3.4 小结与讨论

第四章 HPLC指纹图谱的初步建立

4.1 仪器与试药

4.2 供试品溶液的制备

4.3 色谱条件筛选

4.4 方法学考察[44-45]

4.5 小结与讨论

第五章 广东万年青药理活性初步研究

5.1 广东万年青提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

5.2 广东万年青提取液对伤口愈合的影响

5.3 广东万年青提取液抗菌性实验

5.4 广东万年青提取液的皮肤刺激性实验

5.5 小结

结论

展望

参考文献

学习期间发表的论文

致谢

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摘要

目的:对民间用药广东万年青进行薄层色谱和HPLC指纹图谱的鉴别研究,并对其进行初步药理活性研究,为广东万年青药材的鉴别和开发利用提供实验资料。
  方法:①运用浓硫酸-醋酐反应、苦味酸反应等实验方法对广东万年青药材提取液进行成分测试;②通过对展开系统和显色方法的筛选,进行广东万年青薄层色谱的鉴别研究;③通过对检测波长、流动相体系、柱温等色谱条件的筛选,进行广东万年青HPLC指纹图谱的研究;④利用二甲苯致小鼠耳肿胀法、广东万年青提取液对伤口愈合的影响和抗菌性实验这三组实验对广东万年青的药理活性进行初步研究,并利用皮肤刺激性实验来考察广东万年青提取液的安全性。
  结果:①广东万年青提取液对氯化钠-明胶试验、浓硫酸-醋酐试验、Keller-Killiani试验、苦味酸试验和改良碘化铋钾试验呈阳性反应;②初步建立广东万年青薄层色谱,利用方法学考察验证该薄层色谱法重现性好,斑点清晰,专属性强;③初步建立广东万年青HPLC指纹图谱,并运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对同产地广东万年青6批次的HPLC指纹图谱进行相似度评价,其相似度均大于0.95;④二甲苯致小鼠耳肿胀实验结果表明,广东万年青提取液高剂量组肿胀抑制率为56.25%,肿胀度为(0.0035±0.0007)g,与空白对照组(0.0080±0.0009)g相比较存在着显著的统计学差别(P<0.01),本品对二甲苯所致的小鼠耳肿胀具备一定的抑制作用;广东万年青提取液对伤口愈合的影响实验表明,广东万年青提取液对小鼠皮肤伤口的愈合具备一定的促进作用;抑菌试验结果表明,广东万年青提取液对变形杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有不同抗菌活性,变形杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.25g/mL(g生药/mL),对白色念球菌无抑制作用;皮肤刺激实验表明广东万年青提取液对小鼠皮肤无刺激作用。
  结论:广东万年青药材所含的成分中可能以皂苷类和生物碱类成分为主;初步建立广东万年青薄层色谱和HPLC指纹图谱,其稳定性、重复性良好,可用于广东万年青的鉴别及质量控制;广东万年青提取液具备一定的抗菌、抗炎作用,同时对损伤皮肤的愈合具有一定的促进作用,且安全无刺激性,可为广东万年青新药研发提供实验研究资料。

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