中草药微生态制剂的研制及其在罗非鱼养殖中的应用

摘要

近年来，各类疾病的出现已重创我国水产养殖业，加上抗生素等化学类药物使用所带来的种种弊端已经严重危害人类和水产养殖动物的健康。中草药和微生态制剂作为绿色、环保的抗生素替代物是目前的研究热点。本研究利用益生菌和中草药的协同作用，将二者结合，应用于罗非鱼养殖中，主要的研究结果如下:
　　1、根据实验室前期研究，挑选对嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和纳豆芽孢杆菌等5种益生菌均有促生长效果的9种中草药，对它们进行合理配比，制成A、B、C三种复方制剂。研究在培养基中添加不同浓度的复方中草药制剂对嗜酸乳杆菌、粪肠球菌等5种益生菌体外增殖效果，以确定适宜的添加浓度。研究结果表明: A、B、C复方制剂均能促进5种益生菌体外生长，B方对5种益生菌的促增殖效果优于A方和C方。对嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和纳豆芽孢杆菌来说，以添加5％的B方中草药提液的增殖效果最好，对枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌而言，B方中草药提取液的添加量以8％较为适宜。
　　2、选用均重为（9.5±0.5）g的健硕吉富罗非鱼苗450尾，分成个5处理，每个处理3个重复，每个重复30尾。设置对照组（A组）、单一芽孢杆菌组（B组）、单一中草药芽孢杆菌组（C组）、复合益生菌组（D组）、中草药复合益生菌组（E组）五个处理组，研究中草药微生态制剂对吉富罗非鱼的生长性能、肠道菌群及抗病力等方面的影响。研究结果表明:(1)与对照组相比，在罗非鱼饵料中添加中草药微生态制剂可以显著的提高其肠道中的细菌总数、双歧杆菌、乳酸杆菌和芽孢杆菌的数量(p＜0.05)，也可显著地减少大肠杆菌的含量(p＜0.05);此外，中草药微生态制剂的使用效果亦好于益生菌组。(2)添加中草药微生态制剂可以显著提高罗非鱼的增重率和特定增长率(P＜0.05)，与对照组相比，各试验组饲料系数分别降低了1.65％、2.48％、2.48％、5.79％，但影响不显著(P＞0.05)。(3)人工感染无乳链球菌后，试验组罗非鱼的免疫保护率分别为44.4％、55.6％、55.6％和66.7％。饲料中添加中草药微生态制剂能较好的提高吉富罗非鱼的免疫保护率，添加量为2×107cfu/g。
　　结论:B方中草药制剂对嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和纳豆芽孢杆菌等5种益生菌有较好的体外促增殖作用;饲料中添加中草药微生态制剂可以改善罗非鱼的肠道菌群结构，促进罗非鱼生长，提高其抗病能力。

目录

声明

摘要

1 文献综述

1．1 中草药

1．1．1 中草药饲料添加剂的定义

1．1．2 中草药饲料添加剂的特点

1．1．3 中草药在水产养殖中的应用

1．2 益生菌

1．2．1 益生菌的概念

1．2．2 益生菌的特征

1．2．3 益生菌添加方式

1．2．4 益生菌在水产养殖中的应用

1．3 中草药和益生菌协同作用研究

1．3．1 作用的协同性

1．3．2 理论基础的一致性

1．3．3 中草药对益生菌的增殖作用

1．3．4 益生菌可加强中草药在机体内发挥药效

1．4 罗非鱼及其养殖状况

1．5 本研究的目的意义

2 中草药对益生菌的体外增殖作用

2．1 实验材料

2．1．1 试验菌种

2．1．2 中草药

2．1．3 试验用培养基

2．1．4 主要仪器

2．2 实验方法

2．2．1 菌种活化

2．2．2 复方中草药的配置

2．2．3 中草药培养基的配置

2．2．4 中草药对待测菌株的促生长作用测定

2．3 实验结果

2．3．1．复方中草药对枯草芽孢杆菌体外生长的影响

2．3．2 复方中草药对地衣芽孢杆菌体外生长的的影响

2．3．3 复方中草药对纳豆芽孢杆菌体外生长的影响

2．3．4 复方中草药对嗜酸乳杆菌体外生长的影响

2．3．5 复方中草药对粪肠球菌体外生长的影响

2．4 讨论

2．4．1 中草药对乳酸杆菌生长的影响

2．4．2 中草药对芽孢杆菌生长的影响

3 中草药微生态制剂对罗非鱼肠道菌群影响

3．1 试验材料

3．1．1 试验菌株

3．1．2 中草药

3．1．3 实验鱼

3．1．4 试验用培养基

3．2 试验方法

3．2．1 中草药微生态制剂制备

3．2．2 试验饲料的制备

3．2．3 试验设计

3．2．4 饲养管理方法

3．2．5 样品采集和处理

3．2．6 肠道细菌测定

3．2．7 数据处理

3．3 结果与分析

3．3．1 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道细菌总数的影响

3．3．2 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道大肠杆菌的影响

3．3．3 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道双歧杆菌的影响

3．3．4 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道乳酸杆菌的影响

3．3．5 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道芽孢杆菌的影响

3．4 讨论

3．4．1 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道细菌总数的影响

3．4．2 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道益生菌数量的影响

3．4．3 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼肠道大肠杆菌数量的影响

4 中草药微生态制剂对罗非鱼生长性能和抗病力的影响

4．1 试验材料

4．2 试验设计

4．3 生长性能测定

4．4 攻毒试验

4．5 结果与分析

4．5．1 中草药微生态制剂对罗非鱼生长性能的影响

4．5．2 中草药微生态制剂对吉富罗非鱼抗病力的影响

4．6 讨论

4．6．1 中草药微生态制剂对罗非鱼生长性能的影响

4．6．2 中草药微生态制剂对罗非鱼抗病力的影响

5 总结

参考文献

致谢

作者简介

导师简介