抗HIV-1gp41核心结构合成肽C34、C46单克隆抗体的制备及其生物学活性研究

摘要

HIV-1跨膜蛋白gp41通过介导病毒与靶细胞膜的融合促进病毒侵入.Gp41的胞外区由两个包含α螺旋的疏水重复序列组成,即位于N-末端的融合肽NHR和C-末端的CHR.衍生于NHR和CHR区的合成肽分别命名为N-多肽和C-多肽.其中具代表性N-36和C-34多肽结合具有显著的gp41核心结构的特性.由于单抗比多抗更适合于筛选鉴定中和表位.合成的N-多肽和C-多肽可以作为免疫原,诱生出gp41天然构象特异的单克隆抗体,作为一种很好的工具来筛选抗HIV多肽,我们制备了针对C-34(与具有抑制HIV-1感染活性的SJ2176和DP178有复复序列)肽的三株单抗以及C-46(C34+包含ELDKWA序列的12肽)的两株单抗,它们分别识别位于C-34多肽上不同的表位.上述结果提示1G1抗体为增强性抗体,这意味着其识别的表位可诱导增强性反应.为了进一步明确C34上这一增强性表位的特点,我们用纯化的单克隆抗体1G1以噬菌体随机12肽库进行了3轮筛选(Biopanning),随机挑取17个克隆扩增,获得噬菌体原种.经鉴定,获得6个可以与1G1单抗、13个可怀抗gp41多抗、并有7个与N-36多肽结合的噬菌体性克隆,证明这些克隆模拟了C-34多肽的一段序列,而且具备与N-36多肽结合的特性.

目录

英文缩略词表

前言

第一部分gp41合成肽C34和C46单克隆抗体的制备及其鉴定

第二部分抗C34与C46单克隆抗体的纯化及其生物学活性研究

第三部分单克隆抗体1G1识别表位模拟肽的筛选和鉴定

全文结论

参考文献

致谢

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综述