白介素-1导致糖皮质激素抵抗及其信号转导机制的初步研究

摘要

[背景]自身免疫性疾病(AID)发病机制复杂，自身反应性T细胞、B细胞的激活，是AID过程中一个重要环节，表现为细胞因子(Cytokine,CK)分泌紊乱和自身抗体的增加。其中，白介素-1(IL-1)是一种多功能细胞因子，是AID的重要参与者，与多种病理过程有关，具有促免疫和促炎症特性。在生理状态下，体内只有少数的细胞表达IL-1mRNA，但是在感染、炎性因子刺激下，绝大多数的细胞均可以表达，主要有单核/巨噬细胞，淋巴细胞等。 糖皮质激素(GC)是AID的主要治疗药物之一，外源性的GC进入体内必须和糖皮质激素受体(GR)结合后才能发挥抗炎、抑制免疫的作用。在抗炎过程中，GC的一个重要作用就是抑制细胞因子的产生，从而降低炎症反应中细胞因子的作用。但是，在临床治疗AID过程中，部分患者表现出GC治疗不敏感甚至无效。 丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)是信号从细胞表面转导到细胞内部的重要传递者，包括ERK通路，JNK通路，P38通路等。MAPK家族参与了细胞生长、发育、分裂及细胞间功能的同步等多种生理过程，并在细胞恶性转化等病理过程中起重要作用。细胞外刺激，如：应激，细胞因子(IL-1，TNF-α等)可以激活JNK通路或者P38通路。ERK通路也可能与炎症反应有关，但是其激活物为生长因子等。有研究表明IL-1引起的GR的表达减少和P38通路有关。那么，此过程中是否只有P38通路这一条信号转导通路的作用?ERK通路和JNK通路是否也在此过程中发挥作用?多条信号转导通路之间是否存在协同作用?目前的研究还没有明确的报道。所以，在本研究中，从细胞水平探讨IL-1β对GR影响，通过使用3种细胞信号转导通路的特异性阻滞剂预先处理体外分离的单核细胞，分别阻断：P38通路、JNK通路、ERK通路，再用IL-1β刺激预处理的单核细胞，采用半定量RT-PCR方法检测其GR表达的改变，以期探讨其可能的机制。为阐明糖皮质激素抵抗的发病机制提供部分实验依据。 [目的] 1、通过免疫组化的方法定性研究体外分离的单核细胞在IL-1β刺激前后GR表达的变化。 2、通过使用IL-1β刺激体外分离的单核细胞，采用半定量RT-PCR的方法检测刺激前后GR表达的改变。预先应用特异性细胞信号转导通路阻滞剂分别阻断体外分离得到的单核细胞P38通路、JNK通路、ERK通路，检测IL-1β刺激后单核细-Ⅱ-胞GR表达的改变，以探讨介导此过程中可能的细胞信号转导通路。 [结论] 1、IL-1β可以导致体外分离的单核细胞GR表达的减少，推测IL-1β的这种作用可能是引起糖皮质激素抵抗的原因之一。 2、IL-1β导致体外分离的单核细胞GR表达减少的作用是通过P38通路、JNK通路等信号转导通路介导的，并且二条信号转导通路之间存在正向协同作用。 3、ERK信号转导通路在IL-1β导致的单核细胞GR表达减少过程中基本不起作用。

目录

文摘

英文文摘

前言

技术路线图

引言

第一节 试验材料和设备

第二节 实验方法

第三节 结果

第四节 讨论

小结

参考文献

附录

1英文缩略词表

2文献综述 白介素-1对于糖皮质激素受体的影响

致谢

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