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鸡传染性支气管炎病毒中国主要疫苗株的分子特性

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论文说明:答辩委员

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引 言

1.1国内外研究现状

1.1.1鸡传染性支气管炎概述

1.1.2鸡传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展

1.1.3鸡传染性支气管炎疫苗的研究进展

1.2研究目的和意义

1.3研究内容和方法

研究报告

2.1材料和方法

2.1.1病毒

2.1.2鸡胚、鸡外周血红细胞和SPF雏鸡

2.1.3载体与受体菌

2.1.4主要试剂

2.1.5引物

2.1.6主要仪器设备

2.1.7病毒增殖

2.1.8红细胞凝集试验

2.1.9电镜检测

2.1.10病毒RNA的提取

2.1.11反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

2.1.12 PCR产物鉴定及纯化回收

2.1.13 PCR产物连接与转化

2.1.14重组质粒提取、鉴定及序列测定

2.1.15基因序列确定及分析比较

2.1.16 IB疫苗对异种IBV分离株的保护型

2.2结 果

2.2.1商品疫苗毒致鸡胚病变特征

2.2.2病毒尿囊液对鸡红细胞的凝集活性

2.2.3电镜检测

2.2.4 IBV疫苗株序列分析

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.1IBV疫苗株部分基因组序列的确定及特征

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.2S基因

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.3基因3

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.4M基因

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.5基因5

2.2.4 IBV疫苗株序列分析2.2.4.6N基因

2.2.5 IB疫苗对异种IBV分离株的保护型

2.3讨论

2.3.1疫苗毒增殖及鉴定

2.3.2分子特征

结 论

参考文献

附 录

致 谢

作者简历

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

本文介绍了疫苗株与我国现地IBV分离株基因之间的低核苷酸序列同源性和系统发育关系表明:我国现地IBV分离株与疫苗株之间的基因型不同,这可能是我国免疫鸡群中IB频繁发生的原因之一。 本文根据IBV疫苗株S1基因的系统发育关系,选择5株最具有代表性的疫苗(JAAS,IBN,Jilin,28/86,J9)进行免疫保护试验。死亡的免疫鸡和非免疫鸡的病理变化主要表现为:肾脏肿大、苍白,肾小管和输尿管有白色的尿酸盐沉积,外观呈现典型的“花斑肾”。病理变化表明免疫鸡的死亡是由肾致病性分离株tl/CH/LDT3/03攻毒引起的。免疫保护试验结果表明:我国目前使用的主要活疫苗对感染异种IBV分离株而发病的免疫鸡群不能提供完全的保护作用。

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