抗兔病毒性出血症卵黄抗体的制备与应用

摘要

兔病毒性出血症是一种严重危害家兔生产的传染病。病毒性出血症在新疫区死亡率可达95％以上，老疫区一般为70％-85％。因该病常呈暴发性流行，发病率及死亡率极高，给养兔业带来了巨大的经济损失。该病无有效治疗药物，疫苗接种7-10d后才能产生足够抗体，不能及时有效保护。因此，研究在疫苗免疫建立之前对兔病毒性出血症易感兔群有保护作用的方法，对控制兔病毒性出血症有一定意义。本试验通过制备高效价兔病毒性出血症高免卵黄抗体，探讨高免卵黄抗体对兔的被动免疫保护效果。 本试验采用1998年学院实习场发病分离毒株，制成兔病毒性出血症灭活疫苗。经基础免疫3次和加强免疫普通产蛋鸡，可使其卵黄抗体HI效价(log2)达到14，并能维持7w以上。采用辛酸-硫酸氨二步盐析法-离子层析交换法，从卵黄液中提取高滴度兔病毒性出血症卵黄抗体。攻毒保护试验表明，在攻毒前注射兔病毒性出血症卵黄抗体2.0ml/kg(卵黄抗体含量0.5mg/ml)，连用3d，对攻毒兔的保护率达100％，取得与高免血清一致效果。使用试验结果测出的有效治疗剂量对3个兔群在病毒性出血症高发季节前，间隔15d进行2次预防接种，与历年相比，有效降低发病率。

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第一章文献综述

1.1兔病毒性出血症的研究进展

1.1.1病原学特点

1.1.2流行病学

1.1.3发病原因：

1.1.4兔病毒性出血症的临床症状及病理变化

1.1.5兔病毒性出血症的诊断：

1.1.6兔病毒性出血的预防

1.1.7兔病毒性出血症的治疗

1.2鸡卵黄抗体的研究进展

1.2.1 IgY特性

1.2.2 IgY提取纯化方法的研究进展

1.2.3 IgY在临床上应用的研究进展

1.2.4应用IgY应注意的问题

第二章抗兔病毒性出血症卵黄抗体的制备

2.1实验材料

2.1.1主要仪器

2.1.2材料与主要试剂

2.1.3实验动物

2.2实验方法

2.2.1抗原制备

2.2.2实验动物免疫注射

2.2.3血凝实验-血凝抑制实验

2.2.4实验动物免疫后抗体监测：

2.2.5 IgY提取：

2.2.6安全性检测

2.2.7保存条件对IgY效价的影响

2.3实验结果

2.3.1实验动物免疫效果(见表2-3)

2.3.2兔病毒性出血症IgY消长规律

2.3.3三种不同提取方法蛋白含量、回收率

2.3.4安全性检验的结果

2.3.5保存条件对IgY效价的影响

2.4讨论

第三章抗兔病毒性出血症卵黄抗体的应用

3.1实验材料

3.2实验方法

3.2.1家兔病毒性出血症抗体检测

3.2.2攻毒保护试验

3.2.3家兔病毒性出血症高免卵黄抗休的临床应用

3.3实验结果

3.3.1攻毒保护试验结果(见表3-1)

3.3.2临床防疫效果(见表3-2)

3.4讨论

第四章全文结论

参考文献

致 谢

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