mRNA差异显示筛选悬铃叶苎麻无融合生殖相关基因的基础研究

摘要

无融合生殖对作物遗传育种具有潜在的应用价值,对无融合生殖基因的研究有利于揭示其遗传机理并将之应用于实际生产。大孢子母细胞时期是无融合生殖与有性生殖发育的分水岭,是无融合生殖相关基因表达最活跃的时期。本研究用悬铃叶苎麻二倍体中无融合生殖类型与有性生殖类型的雌花作为试验材料,测量其花序长、花数、花序轴直径、小花簇直径等指标,通过雌蕊整体透明技术选取处于大孢子母细胞发育期的胚珠,同时分析悬铃叶苎麻二倍体雌花的外部形态特征与胚珠的不同发育阶段的相关性,建立外部形态指标与内部胚珠发育相对应的准确取材技术体系。在此基础上,通过mRNA差异显示的方法,对处于大孢子母细胞时期的悬铃叶苎麻二倍体无融合生殖株和有性生殖株的胚珠基因表达差异进行分析。分别提取两种生殖型植株该时期雌花的总RNA,以之为初始模板进行RT-PCR反应,并回收差异片段加以分析。对差异片段测序并在NCBI上进行BLAST比对,结果显示在分离的14个差异片段中有4个与生殖调控相关,分别为fis基因、F-box基因、生长素PIN9蛋白及蓖麻假想蛋白相关片段。