小麦孢囊线虫寄生性真菌分离鉴定和控制效果初步测定

摘要

小麦孢囊线虫是世界上广泛分布的一种植物病原，给小麦生产造成严重威胁。线虫的防治手段主要有选育抗病品种、非寄主作物轮作、化学药剂防治和生物防治。近些年来利用微生物代谢产物来防治线虫的研究越来越多。本实验从病土中获得小麦孢囊线虫，进而分离真菌。本实验共分离到25株真菌并鉴定；室内生测后筛选出杀线虫活性高的真菌黑曲霉 NBC001，草酸青霉NBC008和草酸青霉 NBC012，因此测定这三株真菌发酵液的防治效果，包括对线虫孵化的影响和盆栽防治效果。结果如下：
　　1.采自河南许昌和禹州的小麦孢囊线虫经分子鉴定为Heterodera filipjevi种，山东聊城、德州、菏泽和挪威东福尔郡的样品鉴定为H.avenae种。
　　2.从挪威东福尔郡和河南许昌小麦孢囊线虫群体上分离真菌共25株，鉴定22株，其中有青霉属3株，曲霉属4株，被孢霉属8株，链孢霉属、镰刀菌属、木霉属、矛束孢属、镰孢菌属、Microdochium和Plectosphaerella各1株。
　　3.室内生测筛选发现：黑曲霉NBC001、草酸青霉NBC008和NBC012对小麦孢囊线虫、大豆孢囊线虫和南方根结线虫二龄幼虫的毒性。线虫校正死亡率达80％及以上，且随着稀释倍数的增加，线虫死亡率逐渐降低。
　　4.测定黑曲霉NBC001、草酸青霉NBC008和NBC012发酵液防治小麦孢囊线虫和大豆孢囊线虫的效果，结果表明：黑曲霉NBC001、草酸青霉NBC008和NBC012能够较强的抑制线虫孵化，随着稀释倍数的增加，抑制作用逐渐降低。盆栽防治实验结果表明：三种发酵液还能在一定程度上促进植株生长或根伸长。发酵液处理能使孢囊数量减少，减少率均在40%以上。
　　说明黑曲霉NBC001、草酸青霉NBC008和NBC01可以用来防治小麦和大豆孢囊线虫，具有开发应用前景。

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英文缩略表

第一章 引言

1.1小麦孢囊线虫概况

1.2大豆孢囊线虫概况

1.3实验目的及意义

第二章 小麦孢囊线虫群体种类的分子鉴定

2.1实验材料与试剂

2.2 小麦孢囊线虫DNA的提取

2.3小麦孢囊线虫rDNA-ITS片段的扩增及测序

2.4小麦孢囊线虫特异性SCAR扩增引物检测

2.5实验结果与分析

2.6小结与讨论

第三章 孢囊寄生真菌的分离和鉴定

3.1材料与试剂

3.2真菌的分离和纯化

3.3真菌种类的鉴定

3.4实验结果与分析

3.5小结与讨论

第四章 真菌发酵液杀线虫活性的测定

4.1材料与试剂

4.2真菌发酵液的制备

4.3真菌发酵液杀线虫活性的测定

4.4实验结果与分析

4.5小结与讨论

第五章 目的真菌发酵液防治小麦和大豆孢囊线虫的效果测定

5.1实验材料

5.2目的真菌发酵液防治小麦孢囊线虫的效果测定

5.3目的真菌发酵液防治大豆孢囊线虫的效果测定

5.4实验结果与分析

5.5小结与讨论

第六章 全文总结

参考文献

附表1 小麦孢囊线虫ITS测序结果

附表2 真菌ITS测序结果

致谢

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