三种绿豆土传病害病原菌鉴定

摘要

绿豆，属豆科豇豆属作物，是我国最主要的食用豆类之一。它起源于包括中国在内的亚洲东南部，在我国已有2000多年的栽培历史。病虫害是限制绿豆产量的重要因素。目前，国内绿豆上病害发生种类有二十多种，其中主要病害包括白粉病、菌核病和细菌性晕疫病等。近年来，随着气候条件变化、农业种植结构调整以及新的优良品种推广导致的品种单一化，使绿豆上原有病害逐渐加重，新的病害不断出现。本研究针对日渐加重的绿豆枯萎病和新出现的绿豆黄萎病、绿豆疫霉根茎腐病这三种土传病害的病原菌进行系统鉴定，主要取得以下结果:
　　1、将绿豆枯萎病病原菌鉴定为新的尖镰孢绿豆专化型
　　通过对采自吉林、山西、内蒙古、河南、河北、黑龙江、陕西共7个省份的绿豆枯萎病株进行病原菌分离及初步的形态学鉴定，共得到170个尖镰孢菌分离物。随后通过特异性分子检测及致病性测定，确定这些分离物均为尖镰孢。寄主特异性测定及系统发育分析表明，尖镰孢绿豆分离物与其它已知尖镰孢专化型均不相同，因此将其鉴定为新的尖镰孢专化型，命为尖镰孢绿豆专化型(Fusarium oxysporum f.sp.mungcola)。
　　2、将新出现的绿豆黄萎病病原菌鉴定为大丽轮枝菌
　　2014-2015年分别在山西、河北、内蒙古、山东一些绿豆田里发现一种新的病害，其典型症状为叶片黄化，萎蔫，或节间缩短，剖开茎秆可见维管束变褐色。通过对典型病株进行病原菌分离，共获得41个分离物。通过对分离物进行形态学、致病性及分子特征鉴定，证明所有分离物均为大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）。基于在PDA上的菌落特征，分离物可分为三种类型;特异性分子标记检测结果表明，共有27个分离物为race2，未检测到race1;28个分离物鉴定为交配型2，未检测到交配型1;4个分离物为落叶型，11个为非落叶型，其余未检测到特异性条带;致病性测定结果表明，来自山东和河北两个地方的分离物对绿豆具有较强的致病力。
　　3、发现一种新的病害绿豆疫霉根茎腐病，并将其病原菌鉴定为新的豇豆疫霉绿豆专化型
　　2015年在安徽明光绿豆田里发现一种新的绿豆病害，其症状为根茎部有水渍状病斑，随后变黑腐烂，病斑环茎导致植株萎蔫、死亡。通过对病原分离物的形态学观察、致病性测定及分子特征鉴定，确定该病害的病原为豇豆疫霉(Phytophthora vignae)。进一步寄主范围测定结果表明，豇豆疫霉绿豆分离物与豇豆疫霉豇豆专化型和小豆专化型具有不同的寄主范围。因此，本研究将从绿豆根茎腐病株上分离到的病原菌鉴定为豇豆疫霉新的专化型，即豇豆疫霉绿豆专化型(P.vignae f.sp.mungcola)。

目录

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摘要

英文缩略表

第一章 引言

1．1 绿豆及其重要性

1．2 绿豆病害

1．3 作物尖镰孢枯萎病

1．3．1 尖镰孢枯萎病症状及为害

1．3．2 尖镰孢的分类地位

1．3．3 尖镰孢专化型及生理小种

1．3．4 尖镰孢遗传多样性分析

1．3．5 尖镰孢系统进化研究

1．4 作物黄萎病

1．4．1 发生情况

1．4．2 黄萎病病原菌种类

1．4．3 大丽轮枝菌

1．5 作物疫霉根茎腐病

1．5．1 疫霉病的危害

1．5．2 植物疫霉病主要症状及发病特点

1．5．3 疫霉菌寄主范围

1．5．4 疫霉种类的鉴定

1．5．5 疫霉属的系统发育

1．6 土传病害防治方法

1．7 本研究的目的和意义

第二章 绿豆枯萎病病原鉴定

2．1 材料与方法

2．1．1 植物材料

2．1．2 病原菌分离

2．1．3 病原菌形态学观察

2．1．4 致病性及寄主范围鉴定

2．1．5 病原菌分子鉴定

2．1．6 系统发育分析

2．2 结果与分析

2．2．1 病原菌分离

2．2．2 病原菌培养特征及产孢结构

2．2．3 致病性和寄主范围鉴定结果

2．2．4 分子检测结果

2．2．5 系统发育分析

2．3 讨论

第三章 绿豆黄萎病病原鉴定

3．1 材料与方法

3．1．1 植物材料

3．1．2 病原菌分离

3．1．3 病原菌形态学鉴定

3．1．4 病原菌致病性测定

3．1．5 病原菌基因组DNA提取

3．1．6 病原菌分子检测

3．1．7 系统发育分析

3．2 结果与分析

3．2．1 病原菌的分离

3．2．2 病原菌培养特征

3．2．3 致病性测定

3．2．4 病原菌的分子鉴定

3．2．5 分子系统发育分析

3．3 讨论

第四章 绿豆疫霉根茎腐病病原鉴定

4．1 材料与方法

4．1．1 植株材料

4．1．2 病原菌分离

4．1．3 病原菌形态学观察及生物学测定

4．1．4 致病性及寄主范围鉴定

4．1．5 病原菌分子鉴定

4．1．6 系统发育分析

4．2 结果与分析

4．2．1 病原菌形态学特征

4．2．2 生物学性状

4．2．3 致病性测定结果

4．2．4 分子系统发育分析

4．3 讨论

第五章 全文结论

参考文献

致谢

作者简历