鸡传染性囊病诊断技术与免疫防治的研究

摘要

在2000年夏季,我们自河北省南部地区高死亡率的不同鸡群分离到5株(YN、WA、XT、SH和HD)鸡传染性囊病(IBD)病原.通过琼脂凝胶沉淀试验、血清中和试验、致病性和病理学检查以及电镜观察的结果证明,此5株病原均为IBD病毒.将5株病毒接种易感雏鸡后发病症状明显,其中XT和HD的死亡率分别为50﹪和65﹪,是两株超强毒株(vvIBDV).鉴于完全致弱的疫苗免疫保护性较差,我们选择其中毒力最强的XT株和HD株通过绒毛尿囊膜接种鸡胚盲传12代,再在鸡胚成纤维(CEF)细胞上连传12代,经对易感雏鸡的致病性检查结果表明,两株vvIBDV均不引起雏鸡发病.然后将第12代XT株和HD株CEF细胞毒进行Vero细胞适应性传代培育18代,结果表明致弱的XT株和HD株均可在Vero细胞上生长并产生细胞病变(CPE),其病毒滴度XT株为10<'7.2>-10<'8.5>TCID<,50>/0.05ml和HD株为10<'5.6>-10<'8.3>TCID<,50>/0.05ml,并可被抗IBDV特异血清所抑制.用HD株制备的Vero细胞毒皮下和肌肉进行免疫试验、致病性及致瘤性检查,证明该毒株免疫原性良好、毒力低且不返强、无致瘤性.该文首次建立了四种诊断鸡传染性囊病的新技术,即磷酸盐缓冲系统(PBS)代替巴比妥缓冲系统(BBS)进行对流免疫电泳(CIEP)技术、火箭免疫电泳(RIE)技术、鸡源金黄色葡萄球菌蛋白A直接平板协同凝集试验(SPA-CAT)和SPA-扫描免疫电镜(SPA-SIEM)技术.试验结果表明,与琼脂凝胶沉淀试验(AGPT)进行比较,在检测实验感染鸡和疑似IBD病鸡的法氏囊组织抗原时,PBS-CIEP和RIE比AGPT敏感,出现结果早,而SPA-CAT与AGPT相当.因此,SPA-CAT、PBS-CIEP和RIE是早期诊断IBD的简单、廉价、快速、特异且重复性好的新诊断方法.SPA-SIEM检测组织中的IBDV时,结果直观并易于判定病毒的大小和形态.此外,该文对IBD油乳剂组织灭活苗及其与新城疫-肾型和腺胃型传染性支气管炎三联油乳剂灭活苗、治疗IBD的高免蛋黄抗体在兽医临床实践中的应用也进行了试验研究.

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

英文缩略语

第一章引言

1.1研究目的和意义

1.2国内外研究现状

1.3研究内容和方法

第二章鸡传染性囊病超强毒株的分离鉴定及培育

2.1材料和方法

2.2结果

2.3讨论

第三章鸡传染性囊病诊断技术的研究

3.1应用PBS-CIEP诊断鸡传染性囊病的研究

3.2应用火箭免疫电泳技术诊断鸡传染性囊病

3.3 SPA直接平板协同凝集试验诊断鸡传染性囊病的研究

3.4 SPA-扫描免疫电镜技术诊断鸡传染性囊病

第四章鸡传染性囊病免疫的研究

4.1两株鸡传染性囊病病毒对Vero细胞的适应性研究

4.2鸡传染性囊病Vero细胞弱毒疫苗的免疫研究

4.3鸡传染性囊病VCV01弱毒疫苗对鸡新城疫免疫接种的影响

4.4鸡传染性囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫鸡的抗体检测

4.5 IBD油乳剂灭活疫苗对商品蛋鸡的免疫效果研究

4.6传染性囊病-新城疫-肾和腺胃型支气管炎灭活联苗的免疫研究

第五章鸡传染性囊病高免蛋黄抗体的制备及应用

5.1材料和方法

5.2试验结果

5.3小结与讨论

第六章结论与建议

致谢

参考文献

作者简历