阿维菌素系列手性固定相的制备及应用研究

摘要

研究和开发普适性强、柱容量高、柱性能稳定的理想手性固定相一直是色谱工作者孜孜以求的目标。新手性固定相的开发应该包括以下步骤：新的手性选择子的选择-→固定化-→被分离物质的筛选-→手性识别机理的研究。本论文围绕着全新的高效液相色谱手性固定相的开发，根据上述步骤展开，完成了以下工作： 本文率先将农用抗生素引入手性固定相合成工作当中，首次将三种结构相似的农用抗生素：阿维菌素、伊维菌素和甲氨基阿维菌素键合到硅胶表面，制备出一系列全新的高效液相色谱手性固定相，并考察了其在不同色谱模式下对对映异构体的拆分情况，实验结果表明，阿维菌素系列手性固定相对三唑类化合物有着较好的手性分离效果。目前这部分工作已经申请了专利保护。 经过优化后的固定相制备条件为：取干燥的阿维菌素系列化合物3.0g置于250mL圆底三颈烧瓶中，加入100mL干燥吡啶，搅拌5min，然后滴加0.5mL(3-异氰酸酯基丙基)三乙氧基硅烷，氮气保护下70℃反应1h，冷至室温后，加入3.0g经酸处理活化过的硅胶，氮气保护下于70℃继续搅拌反应12h，过滤，依次用吡啶、DMF、甲醇、水、丙酮洗涤数次，60℃真空干燥过夜。称取上述手性固定相3.5g，以四氯化碳为匀浆液，以无水乙醇为顶替液，在60Mpa压力下将固定相装入不锈钢柱(250mm×4.6mmI.D.)中即可得到阿维菌素系列高效液相色谱手性柱。 本文的另一部分首次将圆二色检测器和基于二元检测器的解卷积方法应用于新手性固定相合成的后期工作当中，成功解决了被分离物质筛选的难题，降低手性分离判断对色谱条件的依赖性，减少了色谱条件优化所需要的时间，大大缩短了筛选时间。在手性固定相合成的开始阶段，由于合成路线、方法等的选择不完全合理，会造成所制备的手性色谱柱柱效低，对手性化合物的分离度低；而且由于被分离对象有限及色谱条件选择等方面的原因，分离对象在所制备的手性固定相上未必可以得到很好的分离，这时如果我们使用非手性检测器，由于色谱峰的重叠将会很难判断对映体是否分离，很有可能在手性固定相合成的筛选阶段就将这种手性选择子排除。使用高效液相色谱圆二色检测器将可以在很大程度上避免这种情况的发生，即使在分离因子α接近1.00的情况下，使用高效液相色谱圆二色检测器也可以很清楚的看到对映体的分离。但是这时我们还缺少保留时间、分离因子等关键数据，使用解卷积方法可以使原本重叠的色谱峰分离，并得出诸如保留时间、分离因子、峰面积等的准确数据，这样就可以更好的评价新手性固定相的性能，进一步优化其合成方法及色谱分离条件。 文献报道的解卷积方法需要分步处理，然后得出解方程的所必需常数，最后解出最终结果，步骤繁琐，实现困难。本文在参考了文献方法后，建立了全新的解卷积方法；此方法相对文献方法更简单，并且减少了人为因素在计算过程中的干扰；率先公开了根据方法所编写了程序，实现了对实际样本图谱处理的自动化；最后将此方法实际应用于评价已合成的阿维菌素系列手性固定相。这种应用是一次大胆的尝试，希望为这方面研究工作的进一步开展和完善提供良好的基础和契机。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章绪论

第二章阿维菌素手性固定相的制备及其性能研究

第三章甲氨基阿维菌素手性固定相的制备及其性能研究

第四章伊维菌素手性固定相的制备及其性能研究

第五章圆二色信号解卷积在新手性固定相开发过程中的作用

第六章结论

参考文献

致谢

作者简介