猪源松鼠葡萄球菌的分离鉴定及其致病性研究

摘要

松鼠葡萄球菌属于凝固酶阴性葡萄球菌，广泛存在于自然界中，同时是人类一个重要的病原，主要引起人类的心内膜炎、腹膜炎、败血症、尿道感染、盆腔炎症以及手术中的伤口感染等。然而到目前为止很少有松鼠葡萄球菌引起动物疾病的报道。河北某猪场爆发仔猪渗出性皮炎，在其中一例渗出性皮炎病例的心包液中分离到了一株葡萄球菌。通过生化鉴定和分子水平上的ITS-PCR鉴定，此菌株是松鼠葡萄球菌，用特异性引物扩增脱皮毒素我们发现基因组上含有脱皮毒素C基因，通过RT-PCR也扩增到了脱皮毒素C，证明其发生了转录。通过口服饲喂和肌肉注射1×10<'10>CFU分离菌株对新生仔猪进行攻毒，成功复制了仔猪渗出性皮炎，这一点说明动物口服病原可能是感染的一个重要途径。此外从攻毒实验仔猪的心包液中分离到的葡萄球菌经生化鉴定和ITS-PCR证实也是松鼠葡萄球菌，并检测到了脱皮毒素C，这一切都验证了分离菌株确实是此次仔猪渗出性皮炎的病原。根据CLSI推荐的药敏纸片法，对分离菌株进行药敏实验确定了敏感的抗菌药物，并且通过消毒定量实验找出了此分离菌株的敏感消毒药物及其工作浓度，为疾病防制措施的制定提供了实验依据。 当用大于1×10<'8>CFU的分离菌株对小鼠进行攻毒，小鼠在24小时以内全部死亡；用低剂量5×10<'7>CFU对小鼠攻毒，并分别对攻毒后第1，2，3天的小鼠脏器进行细菌计数发现小鼠脏器第1天的细菌数量最多；此外用1×10<'10>CFU肌肉注射对新生仔猪攻毒，仔猪在12小时内全部死亡，而且没有出现渗出性皮炎的症状。以上三点我们可以得出分离菌株对小鼠和新生仔猪具致死性的，且引起动物快速死亡的原因是分离菌株引起的败血症。

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论文说明：缩略词表

声明

第一章综述

第二章实验材料

2.1实验所用试剂及其配制

2.2主要器材

2.3主要仪器设备

第三章实验方法

3.1河北某猪场渗出性皮炎发病情况的调查

3.2细菌的分离与纯培养

3.3分离菌株的鉴定

3.4分离菌株的菌种保存

3.5分离菌株的药敏实验

3.6分离菌株的消毒实验

3.7分离菌株的致病性研究

3.8分离菌株脱皮毒素的检测

3.9分离菌株耐药因子的检测

第四章实验结果

4.1仔猪发生了致死性渗出性皮炎

4.2分离菌株S.sciuriHBXX06为渗出性皮炎的病原

4.3分离菌株S.sciuriHBXX06的抵抗力

4.4分离菌株S.sciuriHBXX06对仔猪和小鼠具有高致病性

第五章讨论

第五章结论

参考文献

致谢