补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Glu、NMDA-R1及Ca的影响

摘要

目的：通过观察补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Glu、NMDA-R1和Ca2+的影响，探讨补脑膏对脑缺血再灌注导致海马神经细胞损伤的治疗作用及可能机制，为新药开发和临床应用提供依据。 方法：采用反复夹闭双侧颈总动脉结合鼠尾放血引起循环血量减少的方法制备拟急性脑缺血再灌注损伤大鼠模型。选取无特定病原体动物(SPF)SD大鼠80只，随机分为空白组10只和假手术组10只，余60只造模。采用卒中指数评分标准选取40只造模成功的大鼠，随机分为模型组10只、补脑膏中剂量组10只、补脑膏高剂量组10只、步长脑心通组10只。于用药后第12天取材，分别用比色法测大鼠脑组织Glu含量和用流式细胞仪测细胞内Ca2+含量，并做海马区HE染色和免疫组化，观察海马组织的病理改变及NMDA-R1的表达。 结果：模型组大鼠卒中指数>10分、脑组织Glu含量明显升高、脑海马细胞内Ca2+浓度增高，脑海马组织内NMDA-Rl表达增强(P<0.01，与空白组相比)，提示造模成功；补脑膏高、中剂量组及步长脑心通组脑组织Glu含量及脑海马细胞内Ca2+含量明显降低(P<0.01，与模型组相比)，并且各用药组大鼠脑海马组织内NMDA-R1表达明显减弱(<0.0l，与模型组相比)，但补脑膏高、中剂量组与步长脑心通组比较无统计学意义(P>0.05)。病理改变为：模型组海马区神经细胞排列稀疏、紊乱，细胞结构模糊，有的细胞肿胀、变性、坏死，胶质细胞增生；补脑膏中、高剂量组及步长脑心通组海马区神经细胞较模型组有所集中，变性细胞水肿缓解，细胞排列较有序。 结论：补脑膏能够降低脑组织中Glu含量和脑海马细胞内Ca2+浓度，同时能够抑制脑海马组织内NMDA-R1的表达，减轻神经细胞损伤，修复缺血再灌注损伤的神经细胞。因此补脑膏与步长脑心通一样能够对抗脑缺血再灌注损伤，从而补脑膏对缺血性脑血管疾病具有一定的治疗作用。

目录

论文说明：缩略词表

声明

前言

一立题依据

(一)现代医学对急性脑缺血的认识及研究现状

1.脑缺血再灌注损伤病理生理机制

2.急性缺血性脑血管病的治疗

(二)祖国医学对脑缺血的认识及研究现状

1.中医对中风病因病机的认识

2.辩证论治

3.中药复方的应用

(三)实验动物模型研究进展

1.二动脉阻断缺血模型

2.四动脉阻断全脑缺血模型

3.三动脉阻断全脑缺血模型

4.栓塞法

5.线栓法

6.光化学法

7.开颅法

(四)海马区与脑缺血再灌注损伤的相关性研究

二实验研究

1.实验材料

1.1实验动物

1.2实验药物

1.3实验试剂

1.4实验仪器

2.实验方法

2.1动物分组

2.2模型制备

2.3评价模型成功的标准

2.4给药与饲养

2.5标本采集和处理

2.6 Glu、Ca2+、NMDA-R1的检测

2.7统计学处理

3.实验结果

3.1补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠卒中指数评分的影响

3.2补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Glu含量的影响

3.3补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑海马组织细胞内Ca2+含量的影响

3.4补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑海马组织NMDA-R1表达数量的影响

3.5补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑海马组织NMDA-R1表达的影响(见附录1)

3.6补脑膏对脑缺血再灌注损伤大鼠脑海马组织结构的影响(见附录2)

4.讨论

4.1补脑膏的组方分析

4.2本课题所测指标分析及补脑膏作用机理探讨

三结语

1.结论

2.问题和展望

参考文献

致谢

附录