甜瓜ACC氧化酶反义基因植物表达载体的构建及其转化甜瓜品种‘GT-1’的研究

摘要

乙烯在高等植物的生长、发育、成熟、衰老过程中起着重要作用,乙烯的产生与果实的软化、腐烂有密切关系.1979年,Adman和Yang阐明了乙烯的生物合成途径,证明了ACC合成酶和ACC氧化酶是植物体内乙烯合成中的两个限速酶.降低跃变型果实ACC合成酶和ACC氧化酶基因的表达,进而减少乙烯的生成量,就可以延缓果实的后熟过程,延长果实的贮藏期.大多数甜瓜属于呼吸跃变型果实,传统的贮藏保鲜措施如冷藏,气调贮藏,只能提供一个良好的贮藏环境,减少贮藏环境中乙烯的存在,但难以从根本上解决果实采后软化问题.本研究拟通过反义RNA技术获得转反义ACC氧化酶基因甜瓜植株,以期获得耐贮藏的甜瓜新种质.本项目主要从两个方面进行了研究,一是甜瓜ACC氧化酶反义基因植物表达载体的构建并转化普通烟草;另一个是甜瓜高效遗传转化体系的建立及用ACC氧化酶反义基因转化一个甜瓜栽培品种'GT-1',获得了转基因植株.

目录

文摘

英文文摘

缩略词

第一章：文献综述

1.高等植物与乙烯

1.1乙烯的生物合成

1.2乙烯与果实成熟

1.3乙烯生物合成的基因工程

2反义技术

2.1反义基因的基本概念

2.2反义RNA技术在在果实性状上的控制

3.甜瓜遗传转化研究

4.本研究的目的意义

5技术路线

第二章：甜瓜ACO1反义基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果与分析

2.1载体构建

2.2烟草转化

3.讨论

3.1关于载体的构建策略

3.2关于DNA的凝胶电泳

3.3关于烟草转化

附图

第三章：根癌农杆菌介导的甜瓜品种‘GT-1’的遗传转化研究

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果与分析

2.1种子消毒对发芽率的影响

2.2无子叶无菌苗的生长

2.3参数优化

2.4遗传转化

2.5外植体中GUS基因活性表达

2.6不定芽和完整植株中gus基因基因活性表达

3.讨论

3.1关于报告基因

3.2 AS对甜瓜子叶外植体转化系统的影响

3.3嵌合体和基因沉默

3.4抗生素

3.5卡那霉素标记基因的安全性

3.6玻璃化

图

第四章结论

致 谢

参考文献

个人简介

导师简介

独创性说明