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文献综述 第一章抗菌肽的研究进展
1.1抗菌肽的发现简况
1.2抗菌肽的分类
1.2.1根据来源将其分为以下几类
1.2.2根据合成的部位可分为两类
1.2.3根据结构分类
1.2.4根据生物活性分类
1.2.5根据所带电荷分类
1.3防御素的分布
1.3.1 α-防御素
1.3.2 β-防御素
1.3.3 θ-防御素
1.4防御素的分子特征
1.4.1 α-防御素
1.4.2 β-防御素
1.4.3 θ-防御素
1.4.4昆虫防御素
1.4.5植物防御素
1.5抗菌肽的作用机理
1.6结构和功能关系
1.6.1正电荷对低聚反应的作用
1.6.2二硫化物排列的作用
1.6.3其它结构模式的作用
1.6.4防御素的活性与肽链个别氨基酸残基关系
1.7防御素的生物学活性
1.7.1抗细菌作用
1.7.2抗病毒作用
1.7.3抗真菌作用
1.7.4防御素的抗肿瘤作用
1.7.5防御素对免疫细胞的作用
1.7.6防御素的趋化活性
1.8防御素的应用前景
1.8.1在医药领域的应用
1.8.2食品工业中的应用
1.8.3在动植物抗病育种中的应用
1.8.4抗菌肽作为饲料添加剂在畜牧业中的应用
1.9本研究的目的、意义及研究方法
1.10结束语
研究内容:第二章牦牛中性粒细胞防御素的提取与生物活性测试
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1牦牛血液中各种细胞成分的漂浮密度
2.2 PMN的纯化分离结果
2.3 PMN颗粒组分的分离及其蛋白的提取结果
2.4抑菌活性检测结果
2.5溶血活性检测
2.6血细胞凝集活性检测
3讨论
3.1分离方法的选择
3.2牦牛中性粒细胞粗提物的活性
4小结
第三章牦牛中性粒细胞抗菌肽的分离纯化
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1 Bio-Gel凝胶过滤的分离效果
2.2抑菌活性测定
2.3反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化的效果
2.4活性测定
2.5质谱测试分析
3讨论
3.1防御素的纯化方法
3.2防御素的色谱纯化模式的选择
3.3蛋白质的纯化技术的发展
4小结
第四章牦牛舌上皮组织β-防御素基因yLAP的克隆与序列分析
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1总RNA提取与检测
2.2 RT-PCR扩增产物的电泳检测
2.3 yLAP基因的克隆与鉴定
2.4目的基因的序列测定
2.5目的基因的基本性质分析
2.6 yLAP基因的核苷酸及氨基酸同源性分析
2.7蛋白质序列的Blast分析
3讨论
3.1牦牛β-防御素yLAP的克隆
3.2牦牛β-防御素yLAP的分析
4小结
第五章牦牛舌β-防御素(yLAP)基因的原核表达及活性测定
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1重组表达载体的构建及鉴定
2.2重组表达载体诱导产物的电泳分析
2.3不同诱导条件对重组载体pET-yLAP表达的影响
2.4重组载体pET-yLAP表达蛋白的分离纯化及体外活性的检测
3讨论
3.1pET-yLAP在大肠杆菌中的表达
3.2表达重组蛋白的初步纯化
4小结
结论
参考文献
附图
致谢
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