赖氨酸对绵羊GHR和IGF-1基因表达调控的影响

摘要

本试验的研究目的是在绵羊日粮中补充赖氨酸盐酸盐，研究不同赖氨酸的添加量对绵羊肝脏和背最长肌中GHR、IGF-1基因表达丰度的影响。试验选用年龄、体重、营养状况相近的陶蒙杂交一代母羊15只，平均分为A、B、C3组。基础日粮由玉米、苜蓿草粉、小麦麸皮、棉籽粕、豆粕、玉米秸秆粉等组成，A、B、C组分别在基础日粮中添加0g、4g、10g赖氨酸盐酸盐。预试期7d，正试期28d。实验结束后，羊全部屠宰，取肝脏和背最长肌组织样品。用荧光定量PCR法测定不同处理中肝脏和背最长肌中GHR基因和IGF-1基因的表达丰度。结果表明： 1．GHR基因在绵羊肝脏组织中的相对表达量随日粮中赖氨酸水平的增加而升高，相对表达量在A组中最低，在C组中最高，三组之间的差异极显著（p<0．01）。 2．GHR基因在绵羊背最长肌组织中的相对表达量随日粮中赖氨酸水平的增加而呈升高的趋势，相对表达量在A组中最低，C组中最高，B组和C组都极显著的高于A组（p<0．01），但B、C组之间的差异不显著（p>0．05）。 3． IGF-1基因在绵羊肝脏组织中和背最长肌组织中的相对表达量随日粮中赖氨酸水平的增加而升高，相对表达量在A组中最低，C组中最高，三组之间的差异极显著（p<0．01）。 4．绵羊GHR基因的表达具有组织特异性，在同一赖氨酸水平下，不同部位的组织中GHR基因的水平不同，添加4g赖氨酸和添加10g赖氨酸时，肝脏组织中的GHR基因丰度都显著高于背最长肌组织中GHR基因丰度（p<0．01）。 5．绵羊IGF-1基因的表达具有组织特异性，在同一赖氨酸水平下，不同部位的组织中IGF-1基因的水平不同，添加4g赖氨酸时和添加10g赖氨酸时，肝脏组织中的IGF-1基因丰度都显著高于背最长肌组织中IGF-1基因丰度（p<0．01）。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语中英文对照

声明

第一部分文献综述

1赖氨酸营养研究进展

1.1赖氨酸在动物体内的营养生理功能

1.2赖氨酸对动物免疫功能的影响

1.3赖氨酸对表观性能的影响

1.4赖氨酸对蛋白质代谢的影响

1.5赖氨酸对蛋白质的代谢效应

1.6赖氨酸调控蛋白质代谢的可能作用机制

2 GHR基因和IGF-1基因介绍

2.1 GHR基因

2.2 IGF基因

3营养对GHR和IGF-1基因表达调控的影响

3.1基因表达的基本理论

3.2营养素对基因表达的调控

4本论文的研究目的和意义

第二部分赖氨酸对绵羊GHR和IGF-1基因表达调控的影响

1前言

2材料和方法

2.1试验动物与试验地点

2.2试验设计

2.3试验日粮

2.4饲养管理

2.5样品采集

2.6主要仪器设备

2.7主要试剂

2.8配制实验所需的试剂、缓冲液

2.9总RNA提取及检测

2.10 RNA的反转录

2.11 PCR引物设计与合成

2.12 PCR扩增及PCR产物的琼脂糖凝胶电泳

2.13荧光定量PCR(两步法PCR)

2.14试验数据分析

3结果与分析

3.1总RNA提取及检测结果

3.2 PCR扩增结果

3.3荧光定量PCR结果

3.4不同赖氨酸水平下同一组织中GHR和IGF-1基因相对丰度的比较

3.5同一赖氨酸水平下不同组织中GHR和IGF-1基因相对丰度的比较

4讨论

4.1 RNA的提取

4.2 PCR扩增

4.3不同赖氨酸水平对绵羊肝脏和背最长肌GHR基因丰度的影响

4.4不同赖氨酸水平对绵羊肝脏和背最长肌IGF-1基因丰度的影响

4.5相同赖氨酸水平对绵羊不同组织中中GHR基因丰度的影响

4.6相同赖氨酸水平对绵羊不同组织中IGF-1基因丰度的影响

5结论

6有待于进一步研究的内容

致 谢

参考文献

附录 实验所需的试剂、缓冲液的配制

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