叶下珠抗新城疫病毒活性成分的筛选

摘要

新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）严重危害我国养禽业的发展，目前主要采取疫苗接种进行预防，尚无其它更有效的防治方法。高效、低毒的中草药在新城疫的防治上越来越受到人们的重视，并取得了显著的研究成果。本项研究旨在筛选中药叶下珠中的抗病毒活性成分，为开发防治新城疫疾病的新药奠定基础。 本项研究采用不同的提取方法，对叶下珠的各组分进行提取和分离，并以新城疫病为模型，应用体内外抗病毒试验方法，对提取物中的抗病毒活性组分进行探讨。1．各组提取物以不同时间给药模式，观察病毒对鸡胚成纤维细胞（CEF）生长的影响，试验结果表明，各组药物对病毒呈现不同程度的抑制作用，其中E-PE组和E-BU组药物与生理盐水对照组相比，其对CEF感染NDV的病变有极显著的抑制作用（P<0．01）。同时，不同的给药方式与抗病毒效果有明显相关性，接种病毒前给药，优于其它给药方式。2．以不同时间给药模式，通过检测鸡胚尿囊液NDV血凝效价，观察药物对病毒在鸡胚中增殖的影响，试验结果表明E-PE组和E-BU组在最大安全浓度能显著抑制病毒在尿囊液上的增殖，抑制效果极显著高于其他药物组（P<0．01），接种病毒前给药的模式与其它模式相比，具有更强的抑制作用。3．应用建立试验动物模型的方法，对2周龄三黄鸡连续灌喂药物一周后，感染病毒，观察药物对鸡群的存活率的影响，试验结果表明，各组药物具有不同程度的预防作用，其中E-PE组和E-BU组的鸡群的存活率达80%，极显著高于生理盐水对照组（P<0．01）。4．通过硅胶柱对E-PE、E-BU两组有效成分进行进一步的分离，并对分离的各组分采用体内试验观察药效，初步发现EP1、EP2、EB3、EB6组具有一定的抗病毒作用，其保护率低于阳性药物对照组利巴韦林，但与生理盐水阳性对照组相比差异显著（P<0．05）。本项研究为进一步探索和开发防治鸡新城疫病的新药奠定一定的基础。

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声明

第一章绪论

1.1 叶下珠的研究进展

1.1.1叶下珠简介

1.1.2叶下珠成分研究

1.1.3叶下珠药理作用研究

1.2鸡新城疫疾病研究进展

1.2.1 新城疫简介

1.2.2新城疫流行病学

1.2.3新城疫病鸡临床症状

1.2.4新城疫病理变化

1.2.5中药成分抗新城疫研究进展

1.3本研究的目的和意义

第二章叶下珠提取液的制备

2.1材料与方法

2.1.1 实验材料

2.1.2方法

2.2结果

2.3 讨论

第三章叶下珠提取物细胞病变抑制试验

3.1.材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2.结果

3.2.1新城疫病毒效价和半数组织培养感染量

3.2.2药物对细胞毒性试验

3.2.3药物在细胞上的抗病毒效果

3.3.讨论

3.3.1细胞病变与药物的安全浓度

3.3.2不同提取物的抗病毒活性

3.3.3不同给药方式下药物的抗病毒活性存在差异

第四章叶下珠提取物病毒抑制试验

4.1.材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.2 结果与讨论

第五章临床抗病毒试验

5.1.材料与方法

5.1.1材料

5.1.2方法

5.2.结果

5.2.1新城疫病毒效价和2周龄三黄鸡的LDso

5.2.2 14日龄三黄鸡对药物耐受量的结果

5.2.3体内抗病毒实验结果

5.2.4剖检变化

5.3.讨论

第六章叶下珠E-PE和E-BU组硅胶柱分离试验

6.1.材料方法

6.1.1材料

6.1.2方法

6.2.结果

第七章叶下珠硅胶柱分离组分临床试验

7.1.材料与方法

7.1.1材料

7.1.2方法

7.2.结果

7.3讨论

全文总结

致 谢

参考文献

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