不同浓度柴胡郁金水煎液抑制人肝癌HepG2细胞株的实验研究

摘要

[目的]
　　 探讨柴胡郁金水煎液的抑癌机制及此方在肝癌临床治疗中应用的前景。
　　 [方法]
　　 将人肝癌细胞株HepG2分为对照组（含10％胎牛血清的高糖DMEM培养液）和5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-Fu)药物组、柴郁实验组（分为35mg/ml、28mg/ml、21mg/ml、14mg/ml、7mg/ml等浓度组）、柴胡实验组（分为10.5mg/ml及7mg/ml浓度组）、郁金实验组（分为10.5mg/ml及7mg/ml浓度组）。噻唑蓝比色法(MTT)检验不同浓度柴胡郁金水煎液及5-Fu对人肝癌细胞株HepG2的抑制率，并绘出抑制曲线。细胞板计数法描绘生长曲线比较不同浓度药物对人肝癌细胞株HepG2增殖的影响。免疫组化法比较柴胡郁金水煎液对人肝癌细胞株HepG2Ki67蛋白表达的影响。MTT法比较柴胡郁金水煎液21mg/ml组、14mg/ml组与柴胡水煎液及郁金水煎液各组的抑癌效果。
　　 [结果]
　　 MTT检测表明柴胡郁金水煎液对人肝癌细胞HepG2的增殖呈剂量-效应关系，但柴郁35mg/ml组抑制率较柴郁28mg/ml组有所下降，其半数抑制剂量IC50=13.03mg/ml，90％抑制剂量IC90=22.27mg/ml。生长曲线法检测显示柴胡郁金水煎液各浓度组均能抑制癌细胞生长，柴郁35mg/ml组、柴郁28mg/ml组、柴郁21mg/ml组、柴郁14mg/ml组各组抑制作用同5-Fu药物组生长曲线相似，优于柴郁7mg/ml组。免疫组化结果显示柴胡郁金水煎液各浓度组Ki67指数同空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），柴郁35mg/ml组与柴郁28mg/ml组比较无统计学意义(P＞0.05)，其余各浓度组两两比较均有显著差异（P＜0.01）。MTT检测还提示柴胡郁金水煎液与柴胡水煎液对HepG2的抑制率按剂量关系比较均有统计学意义（P＜0.01），而郁金水煎液对HepG2细胞无明显杀伤作用，反而表现出一定的促生长作用，但与空白对照组相比尚无统计学意义(P＞0.05)。
　　 [结论]
　　 1.柴胡郁金水煎液能杀伤人肝癌HepG2细胞，抑制HepG2细胞的生长，呈浓度效应关系。
　　 2.柴胡郁金水煎液能下调HepG2细胞Ki67的表达，呈浓度效应关系。
　　 3.郁金水煎液对人肝癌HepG2细胞无明显杀伤作用，但与柴胡合煎液抑癌效果显著优于单方柴胡水煎液，二者合煎液成分可能通过潜在的增敏、增效作用对肝癌治疗产生效果。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 统计学处理

结果

2．1 各组细胞抑制率

2．2 各组细胞生长曲线

2．3 各组Ki67免疫组化表达情况

2．4 柴胡郁金水煎液与单方柴胡水煎液、郁金水煎液抑癌效果比较

讨论

3．1 中医对肝脏的认识及对肝癌的辨证论治

3．2 现代医学对原发性肝癌的认识及其与Ki67的关系

3．3 现代医学在药物治疗肝癌方面的进展

3．4 中医对柴胡、郁金的认识及其二者在肝癌治疗中的研究与应用

3．5 柴胡郁金水煎液对人肝癌HepG2细胞株的抑制作用及分析

结论

参考文献

附录

致谢

综述

作者简历