环匹酮胺抑制人肝癌细胞株HepG2增殖和促进细胞凋亡作用的机制研究

摘要

目的 探讨环匹酮胺抑制人肝癌细胞株HepG2生长增殖和促进细胞凋亡作用.方法 分别在24、48、72 h时间点以及3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L浓度的环匹酮胺、5-氟尿嘧啶处理人肝癌细胞株HepG2,并设置对照组(空白处理).用磺酰罗丹明B(SRB)比色法来观察对HepG2细胞数目的影响;倒置相差显微镜观察细胞形态学上的变化;膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)染色法来检测对细胞凋亡率的影响;蛋白质印迹法检测Bcl-2、cleaved-caspase-3、Bax凋亡相关蛋白表达水平.结果 环匹酮胺处理24 h开始出现细胞皱缩、破碎以及数量减少,时间愈久细胞形态变化愈明显.环匹酮胺对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,这种抑制作用浓度愈高作用愈强,50μmol/L下作用最强,时间愈久作用愈强,在72 h下作用最强.环匹酮胺在3.125-50μmol/L均较同浓度下的5-氟尿嘧啶效果好.环匹酮胺可减少抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,增加促凋亡蛋白cleavedcaspase-3、Bax表达.环匹酮胺可显著性地使肝癌细胞的细胞周期出现凋亡特异性的Sub-G1分期,引起肝癌的凋亡.结论 环匹酮胺能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖,引导细胞凋亡,改变肝癌细胞周期,其抗癌作用机制需进一步探究.