电针百会、神庭穴对MCAO大鼠学习记忆能力及海马区相关蛋白的影响

摘要

目的:
　　观察电针百会、神庭穴对大脑中动脉闭塞模型(Middle Cerebral ArteryOcclusion，MCAO)大鼠学习记忆功能的作用，脑梗死体积变化，以及对海马区F-actin（纤维形肌动蛋白）、MAP-2（微管相关蛋白2）、PSD-95（突触后密度蛋白95）相关蛋白表达的影响，探讨电针百会、神庭穴改善脑缺血后认知功能障碍的作用机制。
　　方法:
　　将54只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，随机分为假手术组，模型组，电针组，每组18只。以大脑中动脉闭塞法建立大鼠局灶性脑缺血模型。电针组针刺大鼠百会和神庭穴，术后第一天开始干预，每次30 min，每天1次，共干预7天;假手术组手术后回笼饲养;模型组造模后回笼饲养，均不给予电针刺激。在造模后2小时和电针干预7天后，采用Zea longa神经行为学评分方法观察大鼠神经功能损伤情况;各组在造模后第3天至第6天开始采用Morris水迷宫检测大鼠在定向航行试验中的情况，以及在造模第7天检测大鼠在空间探索试验中的情况;干预7天后，采用TTC染色法观察动物脑组织梗塞情况，用免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠梗死侧海马区纤维形肌动蛋白(F-actin)、微管相关蛋白2（MAP-2）、突触后密度蛋白95（PSD-95）的表达情况。
　　结果:
　　(1)神经行为学评分结果显示:在脑缺血2小时后，电针组、模型组和假手术组神经行为学评分比较无统计学意义;电针治疗后7天，与模型组相比，电针组的神经行为评分较模型组明显降低，具有统计学意义（P＜0.05）;
　　(2)Morris水迷宫实验显示:在定向航行试验中（第3天到第6天）:电针治疗能够显著下降平均逃避潜伏期，和模型组、假手术组对比，有明显差异（P＜0.05）;在空间探索试验中（电针第7天），电针组大鼠穿过平台次数，与模型组和假手术组比较差异显著（P＜0.05）;
　　(3)TTC染色法结果显示:经过7天的电针干预后，大鼠梗塞体积电针组与模型组有显著性差异（P＜0.05），提示电针治疗后可减少脑梗死体积;
　　(4)免疫印迹法结果显小:经过7天的电针干预后，电针组与模型组相比，海马区F-actin、MAP-2和PSD-95的蛋白表达增加，具有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论:
　　(1)电针百会、神庭穴可改善MCAO大鼠的学习记忆功能;
　　(2)电针百会、神庭穴可减少MCAO大鼠的脑梗死体积;
　　(3)电针百会、神庭穴可增加MCAO大鼠海马区F-actin、MAP-2和PSD-95的蛋白含量表达，可能与增加了树突棘的数量有关，这可能是电针治疗脑缺血后认知功能障碍的作用机制之一。

目录

声明

摘要

前言

第一章 实验研究内容

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验器械

1．3 实验试剂

1．4 实验设备

2 实验方法

2．1 实验分组

2．2 MCAO大鼠模型(大脑中动脉缺血模型)的制备

2．3 动物神经行为学评分及剔除标准

2．4 干预方法

2．5 水迷宫测试方法

2．6 标本采集

2．7 脑梗死体积测定

2．8 蛋白提取及检测

3 数据统计分析

第二章 实验结果

1 电针百会、神庭穴降低MCAO大鼠的神经行为学评分

2 电针百会、神庭穴改善MCAO大鼠学习记忆能力

3 电针百会、神庭穴减少MCAO大鼠的脑梗死体积

4 电针百会、神庭穴对MCAO大鼠的F-actin、MAP-2和PSD-95蛋白影响

第三章 讨论

1 脑缺血模型的选择

2 Morris水迷宫评价学习记忆功能

3 督脉上选穴的立题依据

4 电针百会、神庭穴对脑卒中后的脑保护作用

5 电针对脑梗死学习记忆恢复机理的探讨

6 针刺对海马区相关蛋白表达的影响

6．1 PSD-95的变化

6．2 MAP-2的变化

6．3 F-actin的变化

7 本课题的不足及展望

结论

参考文献

附录

致谢

文献综述 针刺治疗脑卒中后认知障碍的研究进展

作者简历