健脾益智法对AD大鼠海马-大肠区脑肠肽SP、VIP、NPY影响的研究

摘要

目的:
　　研究健脾益智法对AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPY、VIP、SP表达水平的影响及其关联，探讨脾脑相关理论的微观机制。
　　方法:
　　运用右侧海马注射凝聚态Aβ1-40的方法制作AD大鼠模型，以健脾益智混悬液、吡拉西坦混悬液、生理盐水分组灌胃给药连续治疗4周。以行为学实验，即Morris水迷宫实验和穿梭箱实验，反映大鼠的学习记忆能力，从宏观上评估大鼠痴呆程度。采用半定量RT-PCR法检测比较假手术组、模型对照组、中药组和西药组大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA的表达水平。采用免疫组化方法检测比较假手术组、模型对照组、中药组和西药组大鼠海马区、大肠区脑肠肽VIP、SP的表达水平。
　　结果:
　　1.行为学实验
　　1.1 Morris水迷宫实验结果示:定位航行实验，中药组AD大鼠逃避潜伏期明显低于模型对照组，差异具有统计学意义。空间探索实验，中药组、西药组AD大鼠跨越平台次数明显高于模型对照组，差异具有统计学意义。
　　1.2 穿梭箱实验结果示:学习期（穿梭箱实验第1-8天），第1-3天，各种大鼠主动逃避次数无组间差异，不具有统计学意义。随着训练次数的增加，主动逃避次数随之增加，且组间开始出现差异。第4-8天，中药组AD大鼠主动回避次数明显高于模型对照组，差异具有统计学意义。测试期（穿梭箱实验第9天），中药组AD大鼠主动回避次数明显高于模型对照组，差异具有统计学意义。
　　2.各组大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平
　　2.1 各组大鼠海马区脑肠肽NPYmRNA表达水平结果示:中药组AD大鼠海马区脑肠肽NPYmRNA表达水平明显高于模型对照组、西药组、假手术组，差异具有统计学意义。西药组AD大鼠海马区脑肠肽NPYmRNA表达水平明显高于模型对照组，差异具有统计学意义。
　　2.2 各组大鼠大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平结果示:中药组AD大鼠大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平明显高于模型对照组、西药组，差异具有统计学意义，西药组AD大鼠大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平与模型对照组无明显差异。
　　3.各组大鼠海马区、大肠区脑肠肽VIP表达水平
　　3.1.各组大鼠海马区脑肠肽VIP表达水平结果示:中药组AD大鼠海马区脑肠肽VIP表达水平明显高于模型对照组、西药组，差异具有统计学意义。西药组AD大鼠海马区脑肠肽VIP表达水平与模型对照组无明显差异。
　　3.2.各组大鼠大肠区脑肠肽VIP表达水平结果示:中药组AD大鼠大肠区脑肠肽VIP表达水平明显高于模型对照组、西药组、假手术组，差异具有统计学意义。西药组AD大鼠大肠区脑肠肽VIP表达水平与模型对照组无明显差异。
　　4.各组大鼠海马区、大肠区脑肠肽SP表达水平
　　4.1 各组大鼠海马区脑肠肽SP表达水平结果示:中药组AD大鼠海马区脑肠肽SP表达水平明显高于模型对照组、西药组、假手术组，差异具有统计学意义。西药组AD大鼠海马区脑肠肽SP表达水平与模型对照组无明显差异。
　　4.2 各组大鼠大肠区脑肠肽SP表达水平结果示:中药组AD大鼠大肠区脑肠肽SP表达水平明显高于模型对照组、西药组，差异具有统计学意义。西药组AD大鼠大肠区脑肠肽SP表达水平与模型对照组无明显差异。
　　结论：
　　1.行为学实验结果评价分析得出，健脾益智法、吡拉西坦均可提高AD大鼠学习和记忆能力，且健脾益智法提高AD大鼠学习和记忆能力优于西药。
　　2.健脾益智法可同步上调AD大鼠海马区、大肠脑肠肽NPYmRNA表达水平，是改善其学习和记忆能力的重要途径之一。吡拉西坦仅对AD大鼠海马区脑肠肽NPYmRNA表达水平有上调作用，且上调作用明显低于健脾益智法。
　　3.健脾益智法可同步上调AD大鼠海马区脑肠肽VIP表达水平，是改善其学习和记忆能力的重要途径之一。吡拉西坦对AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽VIP表达水平均无上调作用。
　　4.健脾益智法可同步上调AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽SP表达水平，是改善其学习和记忆能力的重要途径之一。吡拉西坦对AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽SP表达水平均无上调作用。
　　5.健脾益智混悬液通过微观上同步上调AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPY、VIP、SP表达水平，达到宏观上改善AD大鼠学习和记忆能力之效，认为脑肠肽NPY、VIP、SP是脾脑共同的物质基础、是健脾益智法的作用机制，推测脾脑相关理论的微观机制可能与脑肠肽NPY、VIP、SP有关。为进一步研究及临床应用中医药防治AD提供实验依据。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 理论研究

1 脾脑相关的认知

2 脾脑相关的内涵

3 脾脑相关的作用机制

3．1 以“营"为体

3．2 以“意思"为用

3．3 体用关系·

第二部分 实验研究

1 健脾益智法对AD大鼠行为学的影响(Morris水迷宫实验、大鼠穿梭箱实验)

1．1 材料

1．2 方法‘

1．3 结果

2 健脾益智法对AD大鼠海马一大肠区NPY的影响

2．1 材料

2．2 方法

2．3 结果

3 健脾益智法对AD大鼠海马一大肠区VIP、SP的影响

3．1 材料

3．2 方法

3．3 结果

第三部分 讨论

1 阿尔茨海默病简介

2 健脾益智法治疗阿尔茨海默病

3 脾脑共同的物质基础

3．1 神经肽Y

3．2 血管活性肠肽

3．3 P物质

4 行为学实验

4．1 Morris水迷宫实验

4．2 穿梭箱实验

结论

参考文献

附录

致谢

文献综述

作者简历