石斛合剂对db/db小鼠糖尿病肾病相关炎症因子的影响

摘要

目的：
　　观察石斛合剂对糖尿病肾病小鼠肾组织中相关炎症因子的影响，探讨石斛合剂治疗糖尿病肾病的可能机制，为中医药防治糖尿病肾病提供新思路和药物作用的新靶点。
　　方法：
　　db/db小鼠（体重45g左右，SPF级，雄性，11～12周龄）32只，适应性喂养1周后，随机分为模型组、阳性对照组、石斛合剂低剂量组和高剂量组，每组8只。另取同周龄表现正常的db/m非糖尿病小鼠8只为正常对照组。以上各组动物分别灌胃给药，按人体与小鼠体表面积比值的等效剂量折算，石斛合剂低剂量组给予石斛合剂6g/(kg·d)，石斛合剂高剂量组给予石斛合剂12g/(kg·d)，阳性对照组给予格列吡嗪2mg/(kg·d)，正常组和模型组小鼠给予等容量生理盐水。每天1次，连续给药8周。治疗期间每2周测量体重(BW)一次;第0、4、8周，采用割尾法取血，以快速血糖仪检测各组空腹血糖(FBG);实验结束前一天进行葡萄糖耐量试验(OGTT)。实验结束时，处死全部小鼠，检测血清相关生化指标：糖化血清蛋白(GSP)、胰岛素(Ins)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN);HE、PAS染色观察肾组织病理形态变化;ELISA法检测血清、肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及白介素-6（IL-6）蛋白表达;Western blot检测肾组织中TNF-α、MCP-1、ICAM-1及IL-6蛋白表达。
　　结果：
　　1、一般情况实验开始时，模型组小鼠与正常组比较，表现出明显的多饮、多食、多尿、体型肥胖;检测空腹血糖明显升高(P＜0.01)。经药物治疗后，上述情况较前好转。
　　2、FBG、GSP、Ins：与正常组比较，模型组FBG、GSP、Ins明显升高(P＜0.01);与模型组比较，石斛合剂治疗组和阳性对照组均能显著降低FBG、GSP、Ins(P＜0.05，P＜0.01);石斛合剂治疗组与阳性对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　3、OGTT：与正常组比较，模型组FBG明显升高(P＜0.01)，在口服葡萄糖30min后血糖明显升高(P＜0.01)，60min、120min后血糖下降缓慢(P＜0.01)。与模型组比较，石斛合剂治疗组和阳性对照组FBG均明显下降(P＜0.01)，在口服葡萄糖30min后血糖低于模型组(P＜0.05)，60min、120min后血糖持续下降（P＜0.01）。石斛合剂治疗组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　4、TG、TC：与正常组比较，模型组TG、TC明显升高(P＜0.01)。与模型组比较，阳性对照组小鼠的TG和TC均有明显下降(P＜0.05，P＜0.01);石斛合剂低剂量组TG和TC有所下降，但变化无统计学意义(P＞0.05);石斛合剂高剂量组TG和TC均有明显下降，具显著性差异(P＜0.01)。
　　5、Scr、BUN：与正常组比较，模型组Scr和BUN明显升高(P＜0.01);与模型组比较，石斛合剂治疗组和阳性对照组小鼠的Scr和BUN均明显下降(P＜0.05，P＜0.01);石斛合剂高剂量组与阳性对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　6、肾组织病理形态学改变：模型组小鼠肾小球明显肥大，系膜区增宽，毛细血管基底膜增厚;石斛合剂治疗组和阳性对照组均较轻，随着石斛合剂剂量的增加，肾脏病变程度逐渐改善。
　　7、血清、肾组织中TNF-α、MCP-1、ICAM-1、IL-6蛋白表达：模型组明显高于正常组(P＜0.01)，石斛合剂治疗组和阳性对照组明显低于模型组(P＜0.05，P＜0.01)。
　　结论：
　　1、石斛合剂可降低db/db小鼠的空腹血糖和糖化血清蛋白水平，降低高胰岛素血症，显著改善血脂水平、肾功能及肾脏病理损害;
　　2、石斛合剂对糖尿病肾病db/db小鼠肾脏具有保护作用，可能通过下调TNF-α、MCP-1、ICAM-1及IL-6的表达水平，抑制炎症反应，从而延缓糖尿病肾病的进展。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

引言

1 材料

1．3 主要实验试剂

1．5 主要试剂配制

2．1 分组与给药

2．2 标本采集及处理

2．3 指标检测

3 统计学方法

结果

2 各组小鼠体重比较

3 各组小鼠空腹血糖(FBG)和糖化血清蛋白(GSP)的情况

4 各组小鼠葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素(Ins)的情况

5 各组小鼠血脂的情况

6 各组小鼠肾功能的情况

7 各组小鼠肾脏病理检查结果比较

8 各组小鼠血清TNF-α、MCP-1、ICAM-1、IL-6的表达

9 各组小鼠肾组织TNF-α、MCP-1、ICAM-1、IL-6的表达

1 立题依据

2 中医对糖尿病肾病的认识及石斛合剂治疗糖尿病研究

3 糖尿病肾病小鼠模型

4 石斛合剂对db／db小鼠的肾脏保护作用

4．1 石斛合剂对db／db小鼠糖代谢的调节

4．2 石斛合剂对db／db小鼠脂代谢的调节

4．3 石斛合剂对db／db小鼠肾功能的影响

4．4 石斛合剂对db／db小鼠肾组织病理形态改变的影响

4．5 石斛合剂对db／db小鼠血清、肾组织TNF-α、MCP-1、ICAM-1、IL-6表达的影响

5 问题与展望

结论

参考文献

文献综述 炎症因子与糖尿病肾病的关系及中医药防治进展

致谢

作者简历