针刺长强穴对自闭症大鼠IL-1β、IL-6及IL-10水平的影响

摘要

目的：
　　观察针刺长强穴对自闭症大鼠IL-1β、IL-6及IL-10水平的影响
　　方法：
　　Wistar雌、雄大鼠各一只合笼过夜，检查到雌鼠排出于便盘或仍停留在阴道内的白色或淡黄色半透明的阴栓记胚胎第0.5天(Embryofoday，E0.5)，分笼单独饲养。确认受孕后雌鼠单独饲养，随机将受孕雌鼠分成两组，采用随机分组方法，将受孕雌鼠随机分成两组，一组在E12.5时将孕鼠腹腔注射VPA溶液（剂量为600mg/kg，VPA粉末以0.85％生理盐水配成250mg/ml的溶液），作为VPA组，另一组孕鼠注射等量生理盐水，记为空白组。将VPA组产下仔鼠通过发育行为学测评筛选后，随机分为模型组、长强组、非穴组，每组6只。长强组取长强穴，非穴组针刺胁下非经非穴点，具体定位为髂后上棘上2cm，脊柱旁开5cm。针刺时间1min，10天为1疗程，干预1个疗程，空白组与模型组模拟每日抓取1min，在同等条件下饲养。干预前后分别进行旷场实验，取仔鼠眼眶静脉血，采用Elisa法检测各组血清中IL-1β、IL-6及IL-10表达量。
　　结果：
　　1.体重测定结果：与空白组相比，VPA组仔鼠在PND7、PND14、PND21的体重均有显著差异性(p＜0.05)。
　　2.睁眼实验结果：与空白组相比，VPA组睁眼时间较晚，PND12、PND13、PND14、PND15无明显差异，PND16具有显著差异性(p＜0.05)。
　　3.方向趋向性机能结果：与空白组比较，VPA组在PND8、PND9、PND10均有统计学差异(p＜0.05或p＜0.01)。
　　4.游泳实验：与空白组相比，VPA组在PND9、PND11、PND13、PND15等游泳评分均低于空白组，具有显著性差异(p＜0.05)。
　　5.旷场实验：针对垂直运动次数、水平穿越格数以及理毛次数进行统计。①在垂直运动方面，干预前（即PND23）与空白组比较，经造模的三组仔鼠均出现显著性差异(p＜0.01);与模型组比较，长强组与非穴组均无差异。干预后（即PND33），与空白组比较，模型组、非穴组呈显著差异(p＜0.01)，长强组无明显差异(p=0.392＞0.05);与模型组比较，长强组具有显著差异性(p＜0.01)，非穴组无差异。与干预前比较，长强组具有显著差异性(F=-2.226，p=0.026＜0.05)，余未见明显差异。②在水平穿越次数方面，干预前（即PND23）与空白组比较，经造模的三组仔鼠均出现显著性差异(p＜0.01);与模型组比较，长强组与非穴组均无差异。干预后（即PND33），与空白组比较，模型组、非穴组呈显著差异(p＜0.01)，长强组无明显差异(p=0.789＞0.05);与模型组比较，长强组具有显著差异性(p＜0.01)，非穴组无差异。与干预前比较，长强组具有显著差异性(F=-2.201，p=0.028＜0.05)，余未见明显差异。③在理毛次数方面，干预前（即PND23）与空白组比较，经造模的三组仔鼠均无明显差异(p＞0.05)。干预后（即PND33），与空白组比较，均无明显差异(p＞0.05);长强组与非穴组具有显著差异性(p=0.03＜0.05)。与干预前比较，四组仔鼠均无明显差异(p＞0.05)。
　　6.ELISA检测：①血清IL-1β浓度比较：与空白组比较，模型组与非穴组存在统计学差异(p＜0.01或＜0.05)，长强组无明显差异(p=0.997＞0.05);与模型组比较，长强组与非穴组无显著差异(p＞0.05);长强组与非穴组之间无显著差异。②血清IL-6浓度比较：与空白组比较，长强组与非穴组存在统计学差异(p＜0.05)，模型组无明显差异(p=0.075＞0.05);与模型组比较，长强组与非穴组无显著差异(p长强组=0.231，p非穴组=0.251＞0.05)。③血清IL-10浓度比较：与空白组比较，长强组有显著差异性(p=0.039＜0.05)，模型组与非穴组差异更为显著(p＜0.01);与模型组比较，长强组具有差异性(p=0.047＜0.05)，非穴组无统计学差异。
　　结论：
　　1.针刺长强穴可改善自闭症大鼠对外界探索能力，增强运动活性。
　　2.针刺长强穴可提高自闭症大鼠血清IL-1β、IL-10水平，对血清IL-6无明显改变。

目录

声明

摘要

引言

第一章 实验材料与方法

1．材料

1．1 实验动物

1．2 主要试剂

1．3 实验设备

2．实验方法

2．1 动物模型的制备及实验动物分组

2．2 发育、行为学实验

2．3 旷场实验测试

2．4 针刺干预

2．5 血清IL-1β、IL-6及IL-10水平ELI SA检测

3．数据统计

技术路线图

第二章 结果

1．空白组与VPA组发育情况比较

1．1 体重测定结果

1．2 睁眼实验结果

1．3 方向趋向性机能检测结果

1．4 游泳实验

2．旷场实验

3．针刺对血清中IL-1β、IL-6及IL-10含量的影响

3．2 四组大鼠血清IL-6浓度比较

3．3 四组大鼠血清IL-10浓度比较

第三章 讨论

1 自闭症大鼠的建立

2 祖国医学对自闭症的认识与治疗

2．1 祖国医学对自闭症的认识

2．2 祖国医学对自闭症的治疗

2．3 针刺长强穴对自闭症大鼠的影响

3．旷场实验检测结果

4针刺长强穴对细胞因子IL-1β、IL-6及IL-10的作用

4．1 自闭症与免疫系统

4．2 自闭症与细胞因子

4．3 针刺调节细胞因子的功能

4．4 针刺长强穴对IL-1β、IL-6、IL-10水平的影响

6 不足与展望

结论

参考文献

附录

文献综述 自闭症与细胞因子的关系

致谢

作者简历