根癌农杆菌介导的CryIA抗虫基因转化菘蓝(Isatis indigotica Fort.)的研究

摘要

菘蓝(Isatis indigotica Fort.)是十字花科常用的中药材,用量极大,在全国范围内广为栽培.目前,影响菘蓝产量和品质的主要因素之一是病虫害.CryIA基因是一类编码对鳞翅目昆虫有毒性的杀虫晶体蛋白.该研究以根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)为载体,将外源CryIA基因导入菘蓝核基因组,以获得可抗鳞翅目昆虫的转基因植株,从而解决菘蓝栽培中虫害问题.

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摘要

ABSTRACT

第一部分文献综述

1苏云金芽孢杆菌(BT)及BT杀虫蛋白(BT-TOXIN)的杀虫机理

2 BT杀虫蛋白基因分类

3转BT植物的培育

4植物BT抗虫基因工程研究中存在的问题及解决途径

4.1昆虫对转Bt杀虫晶体产生抗性的问题

4.2 Bt杀虫晶体蛋白基因在转基因植物体中的表达水平较低的问题

4.3转Bt植物潜在的生态风险性

第二部分引言

第三部分菘蓝离体培养过程中愈伤组织和再生芽发生的组织学观察

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与分析

2.1不同外植体的形态反应

2.2愈伤组织形成过程中的组织学观察

2.3再生芽形成的组织学观察

3讨论

第四部分根癌农杆菌介导的菘蓝CRYIA基因遗传转化体系的建立

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与讨论

2.1外植体抗生素敏感实验

2.2根癌农杆菌介导的菘蓝遗传转化条件优化

第五部分转基因植株分子检测、抗虫试验及表型特征分析

1材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2结果与讨论

2.1转化再生植株的分子鉴定

2.2转基因植株抗虫实验

2.3转基因植株表型特征分析

结论

参考文献

致谢

附图