孝顺竹中INDETERMINATE1同源基因的克隆及表达分析

摘要

本文采用同源克隆的方法从孝顺竹(Bambusa multiplex)中克隆到了ID1同源基因，并命名为BmID1。核苷酸序列分析表明：BmID1基因含有4个外显子和3个内含子。氨基酸序列显示：其具有ID-domain基因家族的基本特征，有一个假定的核定位信号和四个锌指单元C末端有一个保守的TRDFLG基序。Blastp比对结果显示：BmID1与多花黑麦草(Lolium multiflorum)中的ID1，日本晴（Oryza sativa）的OsID1，玉米(Zeamays)的ID1，同源性较高，在60-75%之间。RT-PCR结果表明：BmID1的表达不具备昼夜节律。因而推测其功能与OsID1相似。SDS-PAGE结果显示，以pET-28a载体可诱导出25KD的融合蛋白，以pET-GTT可诱导出45KD的融合蛋白。蛋白表达量受到温度和载体等条件影响。