猪ROSA26启动子的鉴定与应用

摘要

本研究在猪中对ROSA26启动子进行克隆和鉴定，并检测了其第一外显子和驱动绿色荧光蛋白基因(GFP)的表达活性。通过与小鼠ROSA26启动子的同源比对，在猪13号染色体上得到了一段长为513bp，同源率达到92%的序列，命名为pROSA26启动子。为了验证pROSA26启动子的功能，构建了质粒pEGFP-C1/pR26，用其转染猪胎儿成纤维细胞，并以阳性细胞作为核供体，构建重构胚，同时采用Realtime PCR和RT-PCR检测pR0SA26启动子驱动下第一外显子和GFP基因在猪克隆胚胎各个发育时期和各种组织器官中的表达。