马尾松EST-SSR PCR体系优化

摘要

用单因素法研究马尾松EST-SSR PCR体系中各成分及退火温度对扩增结果的影响。结果显示：优化后的反应体系为：2μL10×Buffer(Mg2+ Free),30 ng模板DNA,0.1875mmol·L-1 dNTPs,3.75mmol·L-1 Mg2+,8 pmol引物,1.0U Taq DNA聚合酶,加水至20μL。退火温度为56℃。并用21个马尾松DNA检验这一优化体系。经过检测试验,优化后的EST-SSR PCR反应体系稳定、可靠、可重复性强。