银杏类黄酮葡糖基转移酶基因片段的克隆与分析

摘要

类黄酮为植物次生代谢产物,对植物自身的生长发育以及人类的健康具有重要作用.类黄酮葡萄糖基转移酶(UDP-glucose-dependent flavonoid glucosyltransferases,UFGT)属糖基转移酶超家族中的第一家族,可催化类黄酮-OH与UDP-葡萄糖反应,使葡萄糖基以O-C键形式与类黄酮分子相连接,生成黄酮糖苷,从而使类黄酮化学稳定性提高、水溶解度增加,更利于其在细胞内积累.根据植物中UFGT氨基酸序列的保守区和银杏中密码子使用频率等,设计了一对简并引物OGTP2和OGTB,利用其进行PCR扩增,克隆到了长度为290bp的银杏UFGT基因片段,命名为GbUFGT-1,该序列可编码96个氨基酸残基.经BLAST分析,其氨基酸序列具有糖基转移酶第1家族结构域和部分植物糖基转移酶PSPG-box序列,且与其他多种植物中的UFGT酶蛋白具有高度的同源性,说明GbUFGT-1为银杏UFGT基因的部分序列.