樱桃荧光AFLP反应体系优化及应用

摘要

以黑珍珠和红灯等樱桃品种为试材,对荧光AFLP分析过程中模板DNA的制备、酶切与连接、酶切连接产物的预扩增与选择性扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等过程中易出现的问题及其解决方法进行了研究,结果表明:改良CTAB法提取甜樱桃嫩叶和老叶DNA均效果很好;200ng DNA双酶切反应4小时,连接产物稀释10倍作为预扩增模板,预扩增产物稀释20倍作为选择性扩增的模板;筛选了64对引物,其中8对扩增效果理想,能够得到清晰、稳定的条带,平均每对引物扩增条带为40.6条,建立了一套适合于樱桃的AFLP分子标记体系.该体系的建立为研究甜樱桃遗传多样性和标记重要农艺性状的技术平台构建奠定了基础.