基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱联合磁珠技术在金黄色葡萄球菌血流感染血清标志物检测中的应用

摘要

目的：应用MALDI-TOF MS分析金黄色葡萄球菌引起的血流感染血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并进行二级质谱鉴定,寻找具有潜在意义的血流感染标志物.rn 方法：建立ICR小鼠金黄色葡萄球菌血流感染模型,收集血清标本,经弱阳离子交换磁珠纯化,MALDI-TOF MS检测及BioExplorer生物软件分析研究金葡菌感染组与正常对照组的血清多肽指纹图谱.应用纳米液相色谱-电喷雾电离-串联质谱对候选多肽氨基酸序列进行鉴定.收集血液标本进行血常规和IL-6检测.收集肝脏、肺脏组织标本进行H.E染色观察.rn 结果：比较金葡菌感染组与正常对照组发现表达上调的多肽有6个,表达下调的多肽有7个,表达呈先上调后下调的多肽有8个.经二级质谱鉴定得到,m/z2794.3为激肽原1;m/z3869.2为血清淀粉样蛋白2;m/z1227.4为β2微球蛋白.随着小鼠感染时间的延长,白细胞水平逐渐升高,与正常组比较差异不具有统计学意义;IL-6在感染1小时左右升高明显,与正常对照组比较差异具有统计学意义.小鼠受金葡菌感染后,H.E染色结果示6小时后小鼠肺脏结构发生破坏,有明显渗出、水肿、白细胞浸润;肝脏在12小时后可发现有炎细胞浸润,有小的坏死灶产生.rn 结论：利用MALDI-TOF MS技术和BioExplorer软件研究金黄色葡萄球菌血流感染的血清多肽,可以发现感染组与正常对照组间的差异多肽并有效地建立这种细菌感染的诊断模型.激肽原1、血清淀粉样蛋白2、β2微球蛋白有望成为新的用于辅助诊断细菌性血流感染的标志物.