根癌农杆菌介导须癣毛癣菌遗传转化条件的优化

摘要

目的：探讨根癌农杆菌介导须癣毛癣菌的遗传转化条件及其影响因素.方法：构建双元载体pDHt/hph,通过根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)方法对须癣毛癣菌进行非定点的遗传转化,并设定不同的共培养温度(24℃,25℃,26℃,27℃,28℃,29℃)、共培养时间(12h，24h，36h,48h，72h)及共培养媒介(尼龙膜、硝酸纤维素膜、滤纸),观察在不同条件下的遗传转化效率.结果：共培养温度、共培养时间、共培养媒介均对根癌农杆菌介导须癣毛癣菌转化效率产生影响.结论：使用尼龙膜做媒介,28℃,共培养48小时为根癌农杆菌介导的须癣毛癣菌遗传转化体系的最优条件。