运用变性高效液相色谱快速检测TEM型超广谱β-内酰胺酶

摘要

本研究使用DHPLC技术检测TEM型ESBLs基因亚型，结果表明，在最适温度下DHPLC分析样本的阳性率为100%，42株TEM阳性标本中，35株出现单一洗脱峰，峰的形态与TEM-1标准参考模板峰型一致。7株表现为异常洗脱峰，其中5株为一种异常洗脱峰，另外2株为另一种异常洗脱峰，异常峰型比单一峰型滞留时间提前0.15-0.30min。与测序结果对比显示35株单一峰型标本均为TEM-1型;5株DHPLC显示为一种异常洗脱峰型的标本为TEM-10，存在第425位碱基由T→C，第335位碱基由G→A两种突变;2株DHPLC显示为另一种异常洗脱峰型的标本测序结果为TEM-116，存在第228位碱基由T→C第396位碱基由T→G2种突变。本研究中DHPLC技术对TEM型基因检测的特异性达100%。另外，TEM-10和TEM-116型ESBLs均为首次在该院发现，应引起临床高度重视，避免引起院内感染。