ART对妊娠中期羊水细胞DNA甲基转移酶-1活性的影响

摘要

DNA甲基化是基因表达的一种重要调控方式，主要由DNA甲基转移酶(DNMTs)催化，将一个甲基添加在DNA分子中的碱基上，最常见的是加在胞嚓咤上由此形成5甲基胞嘧啶，其中以Dnmtl的作用最为重要，主要起维持甲基化的作用，它在机体发育过程中发挥重要生理作用。Dnmtl的变异或缺失可能伴随着印记缺失，或X染色体失活状态异常。不表达Dnmtl的胚胎干细胞能够存活，但甲基化水平下降达60%，同时伴有生长停滞或形态异常，细胞凋亡率明显增加。敲除Dnmtl基因，小鼠原肠胚发生全基因组去甲基化，甚至胎儿死亡此外，也有实验证明小鼠胚胎甲基化转移酶基因如发生缺失，中期妊娠可能发生流产。本实验应用酶活性测定技术检测ART妊娠中期羊水细胞Dnmtl酶活性。结果显示，ART与自然妊娠Dnmtl酶活性及异常率无差异（P＞0.05），由此提示，ART可能并未影响妊娠中期羊水细胞Dnmtl酶活性；但是，研究结果同时表明，无论是ART还是自然妊娠，双胎相对单胎而言，Dnmt1酶活性及变异度均增加，虽然双胎妊娠与单胎妊娠的Dnmt1酶活性异常率无统计学差异，但ART妊娠与自然妊娠相比，双胎妊娠的异常率均高于单胎，佐证双胎有可能是增加妊娠中期胎儿甲基化异常风险的高危因素之一。既往的研究发现甲基转移酶的活性可能受Dnmt的单核苷酸多态性(SNP)影响，Dnmtl外显子的突变影响了蛋白质的表达，而位于内含子的突变会影响剪接的结果；也有学者认为是由于甲基化酶表达量的下降影响了甲基转移酶的活性。DNA甲基转移酶活性调节的机理尚不清楚，同时其的改变给机体发育带来的影响尚需进一步探讨。综上所述，本研究结果提示辅助生殖技术妊娠中期胎儿DNA甲基化转移酶活性可能并未发生改变，但是双胎妊娠可能是增加Dnmtl酶活性异常风险的高危因素之一。由于获得的羊水细胞数量有限，本研究中只对一种DNA甲基转移酶活性进行检测，且标本量较少，未来的工作中尚需扩大样本量，扩展酶的种类，与Dnmt基因表达量及基因甲基化状态相结合有机联系，深入探讨ART、双胎对子代表观遗传学产生的影响。