儿童侵袭性肺炎链球菌血清分型及分子流行病学研究

摘要

目的：了解上海地区儿童侵袭性肺炎链球茵的血清型分布、耐药状况以及运用多位点序列分型(MLST)了解本地区有无国际高耐药菌株的克隆播散或存在其他耐药传播机制.方法：收集上海交通大学附属儿童医院2005-2011年临床分离的侵袭性肺炎链球菌46株,应用荚膜多糖抗血清(Denmark)进行血清学凝集试验,用于明确肺炎链球菌的血清群/型.E-test测定分离株对9种常用抗生素的最低抑菌浓度(MIC).用聚合酶链式反应(PCR)扩增肺炎链球菌的7个管家基因并测序,根据管家基因基因型的组合确定序列分型(ST).结果：46株侵袭性肺炎链球菌共检出血清群/型11种,其中常见血清群/型依次为19F(21.7%,10/46),19A(15.2％,7/46),6B(15.2％,7/46),23F(13.0％,6/46)、6A(6.5％,3/46)和4(6.5％,3/46),另有2株分离株不能为所采用的方法明确分型.PCV7和PCV13的覆盖率本别为60.9％和82.6％.分离株对9种常用抗生素的耐药率分别为:青霉素19.6％,阿莫西林/克拉维酸10.9％,头孢呋辛73.9％，头孢曲松28.3％,红霉素100％，阿奇霉素95.7％，克拉霉素100％,克林霉素95.7％，莫西沙星0％。多重耐药肺炎链球菌(MRSP)的检出率为87.0％。多位点序列分型共检出22种ST,其中以ST320最为常见,占15.2％(7/46),其次为ST1464(10.9％,5/46)和ST271(10.9％,5/46)，上述3种ST共占分离株的37.0％.常见的ST同源复合群是CC271。本研究还发现7种新的ST和5种新的等位基因序列。结论：上海地区儿童侵袭性肺炎链球菌血清型以19F、19A、6B、23F、6A和4为主,分子分型以ST320、ST1464和ST271为主。PCV13的覆盖率远高于PCV7和PCV10，疫苗接种可有效预防MRSP的播散.儿童侵袭性肺炎链球菌对常用抗生素的耐药趋势日趋严峻，上海地区的流行菌株大都为国际高耐药菌株的克隆播散，但基因的变异水平较高。