梓葛冻干粉针剂对人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤保护作用的实验研究

摘要

目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉针剂对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧/复氧损伤的保护作用.方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型.用梓葛冻干粉针剂干预后,采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.结果:与模型组相比,梓葛冻干粉针剂12.5 mg·L-1显著提高细胞活力(P＜0.05);梓葛冻干粉针剂49.0 mg·L-1,24.5 mg·L-1,12.5 mg·L-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性(P＜0.05);梓葛冻干粉针剂24.5 mg·L-1,12.5 mg·L-1能显著减少LDH的释放量及降低MDA和NO的含量(P＜0.05),并上调细胞Bcl-2蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);梓葛冻干粉针剂49.0 mg·L-1,24.5 mg·L-1,12.5 mg·L-1显著降低Bax的表达并上调Bcl-2/Bax(P＜0.05,P＜0.01),且梓葛冻干粉针剂49.0 mg·L-1,24.5 mg·L-1显著降低Caspase-3的表达(P＜0.01).结论:梓葛冻干粉针剂可显著拮抗缺氧/复氧对HUVECs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化和抗凋亡能力有关.