Ⅰ类整合子介导的大肠埃希菌耐药机制的初步研究

摘要

目的：了解成都地区大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药情况,及其所含ESBLs的型别.了解Ⅰ类整合子介导大肠埃希菌耐药的流行情况,以及Ⅰ类整合子中耐药基因盒的种类,分析耐药基因水平传播的机制,为预防用药和临床合理用药提供参考.方法：1.采用纸片扩散法测定大肠埃希菌对16种抗菌药物的敏感性,并应用双纸片法定性检测97株大肠埃希菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分布情况；2.应用PCR的方法 检测大肠埃希菌中SHV、TEM和CTX-M型ESBLs和Ⅰ类整合子整合酶的分布情况,分析ESBLs和Ⅰ类整合子与大肠埃希菌耐药性形成的关系；3.通过DNA测序技术及DNA序列分析对Ⅰ类整合子可变区进行分析.结果：①97株大肠埃希菌中对氨苄西林、甲氧苄定-磺胺甲噁唑、四环素和环丙沙星的耐药率分别为64.9％、62.9％、82.5％和64.9％,对庆大霉素和哌拉西林的耐药率分别为73.2％和79.4％,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率为47.4％、43.3％、39.2％、34.0％和34.0％.②本实验中97株大肠埃希菌中,产ESBLs率为32％,ESBLs阴性和阳性菌株对14种抗菌药物的X2检验差异有统计学意义(P＜0.05).其中CTX-M型ESBLs占61.3％.③大肠埃希菌Ⅰ类整合子占71.1％,对9种抗菌药物的X 2检验差异有统计学意义(P＜0.05).Ⅰ类整合子的可变区的大小有5种长度,155 bp、549 bp、934 bp、1593bp和2 327bp.经过blast比对后,均发现了100％的同源性序列,发现了4种基因盒排布形式为dfrA17+aadA5、aadA1、aacC4+cmlA1和dfr2d,还有一种Ⅰ类整合子可变区中不合有耐药基因盒.结论：大肠埃希菌中ESBLs和Ⅰ类整合子的分布与其耐药性存在相关性,大肠埃希菌中Ⅰ类整合子所含有的耐药基因盒种类在不断更新,使得细菌的耐药性不断升高.