补阳还五汤大鼠含药血清对肺成纤维细胞TGF-β1及其基因表达的影响

摘要

目的：观察补阳还五汤大鼠含药血清对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺成纤维细胞中TGF-β1及其基因表达的影响. 方法：含药血清的制备：24只SPF级SD大鼠,雄性,随机分为3组,即补阳还五汤水煎液组(简称补阳还五汤组,1g生药/ml),强的松水溶液组(简称阳性组,5mg/ml)和生理盐水组(简称模型组),每组8只,补阳还五汤组以9.24g/kg·d(临床等效剂量)进行灌胃,阳性组及模型组以lml/100g灌服相应溶液,每天1次,连续灌服7d,采血前禁食12h,于末次灌胃lh后,腹主动脉取血,离心后分离血清,将收集到的补阳还五汤含药血清配制成含药血清浓度分别为5％,10％,20％的培养液备用;体外培养的肺成纤维细胞,分别加入含5％,10％,20％浓度的补阳还五汤药物血清干预,72h后收集细胞及上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清中TGF-β1的表达,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测细胞中的TGF-β1蛋白基因的表达. 结果：与模型组比较,阳性组和20％含药血清组,10％含药血清组肺纤维化大鼠成纤维细胞中TGF-βl的表达均有显著减少(P＜0.01),5％含药血清组细胞中TGF-βl的表达有减少趋势,三组不同浓度的补阳还五汤含药血清作用效果表现出一定的量效关系;与模型组比较,阳性组和20％含药血清组肺纤维化大鼠成纤维细胞中TGF-β1蛋白基因的表达均有显著减少(P＜0.01);10％含药血清组TGF-β1蛋白基因的表达减少(P＜0.05),5％含药血清组TGF-β1蛋白基因的表达有减少趋势,三组不同浓度的补阳还五汤含药血清作用效果表现出一定的量效关系. 结论：补阳还五汤含药血清能够有效抑制TGF-β1及TGF-β1蛋白基因的表达,这可能是其防治肺纤维化作用的机制之一.