温州市中医院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌表型与基因型的实验研究

摘要

目的：对温州市中医院分离的产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram p-lactamases,ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneuminiae,KPN)进行表型和基因型研究,初步明确其基因型分类和表型分布情况,并初步探讨其区域性流行的机制. 方法：采用NCCLS推荐的表型确诊实验(纸片扩散法)筛选产ESBLs的E.coli和KPN菌株,采用K-B纸片扩散法确定其最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值;采用特异性引物分别扩增所分离菌株的TEM、SHV、CTX-M和OXA基因,并进行测序鉴定;采用质粒接合试验了解其传播情况. 结果：共分离产ESBLs的E.coli120株和KPN30株,其中E.coli和KPN的产ESBLs的阳性率为47.2％和26.0％;药敏试验表明：E.coli和KPN对替加环素、头孢哌哃/舒巴坦、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/三唑巴坦、头孢替坦敏感性好,对头孢曲松、头孢他啶、庆大霉素、头孢比肟、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、氨苄西林/-舒巴坦、头孢唑啉、头孢赛肟耐药率高;基因测序鉴定显示：在E.coli中,带有CTX-M基因56株(46.7％),TEM基因42株(35.0％),SHV基因8株(7.0％),OXA基因14株(11.3％);在KPN中,带有CTX-M基因6株(20.0％),TEM基因4株(13.3％),SHV基因20株(66.7％),OXA基因0株(11.3％);质粒结合率约在在25％左右,其中以带有CTX-M和TEM基因的质粒结合率最高. 结论：本院E.coli和KPN产ESBLs的阳性率明显低于全国三甲医院水平;在产ESBLs的E.coli中,其基因型以CTX-M和TEM为主;而在KPN中,其基因型以SHV为主;本院产ESBLs菌株的主要以水平传播为主.