木糖筛选系统对杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的影响

摘要

在农杆菌介导的遗传转化过程中,抗生素不同程度地抑制山茶转化体的生长与分化.本研究以木糖异构酶基因xylA为筛选标记,试图建立杜鹃红山茶(Camellia azalea)遗传体系过程中的非抗生素筛选系统.从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,并用其替换经改造的植物表达载体pCAMBIA1300中的hptⅡ基因,获得植物表达载体pCAMBIA 1300-xylA并导入根癌农杆菌EHA105中.经农杆菌介导转化烟草,结果表明xylA标记基因可以替代卡那霉素应用于烟草转化体中,且效果更优.以杜鹃红山茶带柄叶片、茎段、子叶为外植体诱导的愈伤组织,生长状态均表现良好,愈伤组织启动诱导的日期比对照组提前约10d,生长量为对照组的1.5～2.5倍.可以认为25 g·L-1的木糖浓度是适合杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的筛选浓度.