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经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢COCs及CCs中GDF9及Bim表达的影响

摘要

目的:观察具有益气血作用的经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢中卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-Oocyte Complexes,COCs)及卵丘细胞(Cumulus Cells,CCs)中生长分化因子9(Growth Differentiation Factor9,GDF9)及Bim表达的影响及差异,探讨其治疗效果及作用机制. 方法:制备大鼠超排卵卵巢模型,收集COCs和CCs,分别与雌性SD超排卵大鼠空白血清和经后增殖方药物血清在体外共同培养,各分3组:空白血清组(空白组),含药血清组(对照组),含药血清+GDF9受体阻断剂组(实验组),共6组.24小时后收集COCs和CCs,实时荧光定量PCR(qPCR)检测GDF9和Bim mRNA的表达水平,Western-blot检测GDF9蛋白的表达水平. 结果:(1)组内比较:①COCs:A.对照组GDF9mRNA相对表达水平显著高于空白组和实验组(P<0.01);B.对照组和实验组Bim mRNA相对表达量均明显低于空白组(均为P<0.05);C.对照组GDF9蛋白相对表达量明显高于空白组(P<0.05),高于实验组,但差异无统计学意义(P>0.05);②CCs:A.GDF9mRNA相对表达水平三组间的差异性比较结果与COCs三组一致;B.对照组和实验组Bim mRNA相对表达量均明显低于空白组(均为P<0.05);对照组Bim mRNA相对表达量明显低于实验组(P<0.05);C.对照组GDF9蛋白相对表达量明显高于空白组和实验组(均为P<0.05).(2)组间比较:COCs对照组GDF9mRNA相对表达水平显著高于CCs对照组(P<0.01),其余组间比较无显著差异(P>0.05). 结论:经后增殖方含药血清能提高COCs和CCs中GDF9的表达水平,维持COCs和CCs中Bim表达的低水平的作用,抑制细胞凋亡,促进卵泡发育;COCs较剔除卵母细胞的CCs更有利于GDF9mRNA的表达.

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