NF-κB信号通路在饮用水有机提取物致L02细胞炎症损伤中的作用

摘要

目的：观察饮用水有机提取物致L02细胞炎症损伤中核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的激活情况及其调控作用. 方法：利用固相萃取法提取饮用水中有机污染物.将L02细胞分别暴露于培养液(空白对照)、0.1％DMSO(溶剂对照)和0.3125、0.6250、1.2500、2.5000、5.0000L/mL饮用水有机提取物中24h、48h、72h.采用免疫印迹(Western blot)方法观察NF-κB信号通路的激活情况;并使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清中白介素(interleukin,IL)8、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的含量. 结果：(1)随有机物浓度的增加及时间的延长,在24h、48h和72h时点,0.6250L/mL以上剂量组NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB)表达水平均明显降低(P＜0.05),而p65蛋白表达水平则明显升高(P＜0.05).(2)有机提取物染毒L02细胞24h和48h后,0.6250L/mL以上处理组的IL-8水平均明显升高(P＜0.05);而在72h,低剂量组(0.3125L/mL)的IL-8水平即已升高明显(P＜0.05);(3)处理24h后,1.2500L/mL以上处理组的TNFα水平明显升高(P＜0.05);而在48h和72h染毒组,TNF-α水平在0.6250L/mL以上处理组即显著升高(P＜0.05).(4)与24h染毒组比较,48h、72h各处理组的IL-8与TNF-α水平均明显升高(P＜0.05). 结论：饮用水有机提取物可剂量-依赖性及时间-依赖性地激活NF-κB信号通路,诱导IL-8及TNF-α的分泌,调控肝细胞炎症反应的发生.