改变HO-1基因表达可抑制DNMT基因并加强地西他宾对p15的去甲基化作用

摘要

目的：探讨骨髓异常增生综合征(MDS)中血红素加氧酶(Heme oxygennase-1,HO-1)基因表达水平与p15基因甲基化的相关性. 方法：选取未处理SKM-1细胞株做为对照组,分别用HO-1基因增强剂Hemin和抑制剂ZnppIX处理的SKM-1细胞为实验组.1.Western blot检测各组HO-1、DNMT1、p15、caspase3、caspase8、caspase9蛋白表达.2.MSP法分别检测各组p15基因的甲基化状态.3.用地西他宾分别对各组进行处理24、48小时,CCK-8Kit及流式细胞术分别检测各组细胞凋亡情况及细胞增殖抑制率. 结果：1.上调HO-1表达可增强DNMT1的表达,并下调p15的表达.相反的,下调HO-1表达可减弱DNMT1的表达,并上调p15的表达;2.上调HO-1表达组中,p15基因甲基化程度高于对照组,而在下调HO-1表达组中,p15基因甲基化程度低于对照组(P＜0.05);3.在上调HO-1表达组,p15基因甲基化程度高,地西他宾处理后细胞凋亡率低于对照组,相对的在下调HO-1基因组,p15基因甲基化程度低,地西他宾处理后细胞凋亡率高于对照组,(P＜0.05). 结论：HO-1基因在SKM-1细胞中充当一个细胞保护的角色,在HO-1高表达的情况下,SKM-1细胞中p15肿瘤抑制基因的甲基化水平增高,肿瘤细胞抗凋亡的能力增加,相对的,在HO-1表达减弱的情况下,SKM-1细胞中p15肿瘤抑制基因的甲基化水平降低,肿瘤细胞易凋亡.针对HO-1进行治疗或许可作为地西他宾治疗MDS的一种新的辅助手段.