Th17细胞在NOD.H-2h4小鼠甲状腺中的变化及芪蛎消瘿汤的调节作用

摘要

目的:观察NOD.H-2h4小鼠甲状腺Th17细胞分化的动态变化及芪蛎消瘿汤对Th17的调节作用,探讨其治疗自身免疫甲状腺炎(AIT)的作用机制.方法:选雌性8周龄NOD.H-2(h)4小鼠,随机分成以下4组:正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、常规剂量芪蛎消瘿汤组(ZY1)、和3倍剂量芪蛎消瘿汤组(ZY3),正常组饲以双蒸水,其余各组饲以舍0.05％碘化钠水,8周后制成AIT动物模型,再给处理因素8周后麻醉处死小鼠,留取各组NOD.H-2(h)4小鼠血清、甲状腺.放射免疫分析法(RIA法)测小鼠血清总T3(TT3)、总T4(TT4),固相化学发光酶免疫法(IRMA法)测定小鼠血清促甲状腺激素(TSH);光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化方法测定小鼠甲状腺IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β蛋白表达;RT-PCR法检测小鼠甲状腺IL-17、IL-23、IL-6、TGF-βmRNA表达;Western blot蛋白印迹杂交法测定小鼠甲状腺组织ROR γt、RORa、STAT3蛋白表达水平.结果:①.各组间血清TT3、TT4及TSH值比较无明显差异(P＞0.05).②.HE染色显示甲状腺组织淋巴细胞浸润,NC,MC,ZY1及ZY3组小鼠AIT的发生率分别为:0/10,10/10,2/10,3/10;MC组甲状腺炎的发生率明显高于NC组.③.MC组IL-17、IL-23、IL-6、TG2FβmRNA及蛋白表达较NC组显著升高(P＜0.01);与MC组比较,ZY1、ZY3组IL-17、IL-23、IL-6、TGF-βmRNA及蛋白表达较MC组显著下降(P＜0.01).④.MC组甲状腺组织ROR γt、RORa、STAT3的蛋白表达量较NC组比明显升高(P＜0.01),ZY1、ZY3组RORa、STAT3表达较MC组明显下降(P＜0.01),ZY1、ZY3组RORγt蛋白表达较MC组下降(P＜0.01、P＜0.05)有统计学意义.结论:Th17细胞参与AIT发生,且芪蛎消瘿汤可能通过下调IL-6、TGF-β、ROR v t、RORa、STAT3的表达,调控IL-23/IL-17炎症轴起到治疗AIT的作用.