TRV介导的观赏花烟草(Nicotiana sanderae)VIGS体系的构建

摘要

本研究以八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase,PDS)基因和查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)基因为报告基因,以烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)为载体建立基于病毒介导的观赏花烟草(Nicotiana sanderae)基因沉默体系(Virus-induced gene silencing,VIGS).结果表明,根吸收法不适用于观赏花烟草的基因沉默体系,而利用叶背注射渗透法对观赏花烟草进行基因沉默的效果较好.在叶背注射渗透法中,用PDS基因作为报告基因时,处理组植株在全黑暗条件下培养l天后进行常规养护,25天后80％植株表现出叶片光漂白现象.在用花青素合成代谢路径上关键基因CHS作为报告基因时,60％的植株在开花后表现出预期花冠褪红斑白的现象,半定量RT-PCR结果显示被沉默植株的CHS基因表达量明显下调,观赏花烟草内源CHS基因被有效沉默.综上所述,本研究初步建立了观赏花烟草VIGS体系.