G-1抑制血管平滑肌细胞增殖和损伤引起的新生内膜增生

摘要

目的:探讨GPR30的激动剂G-1是否抑制血管平滑肌细胞增殖和新生内膜的形成.方法:细胞计数、WST-1和Brdu掺入法用于检测G-1是否抑制血管平滑肌细胞的增殖。通过免疫荧光染色和激光共聚焦扫描验证G-1对于血管平滑肌细胞微管的影响。结果：在人血管平滑肌细胞中，GPR30在蛋白水平和mRNA水平均有表达。实验发现，G-1抑制了人血管平滑肌细胞的增殖。G-1抑制了细胞数量增长和Brdu的掺入。G-1对于细胞增殖的抑制作用可以在转染GPR30 siRNA后被消除。还发现G-1阻止细胞进入S期，并且诱导细胞在G2/M期积累，期间伴随p27蛋白的上调。之后，发现G-1诱导了血管平滑肌细胞中微管损伤。细胞经G-1处理后，EGFR和p44/42 MAPK的磷酸化水平升高。此外，用G-1处理3周后，可以显著降低小鼠颈总动脉血管损伤后所引起的新生内膜的形成。结论：在体外，G-1抑制人血管平滑肌细胞的增殖;在体外，G-1抑制损伤后小鼠颈总动脉新生内膜的形成。这提示GPR30可能是治疗增生性血管疾病，例如动脉粥样硬化和再狭窄的一个潜在的靶点。