尾静脉注射9型腺相关病毒介导的周期素A2因子转染C57小鼠的实验研究

摘要

目的：探讨以9型腺相关病毒作为载体的周期素A2因子通过尾静脉注射转染C57小鼠心肌的可行性及安全性。方法：C57 雄性小鼠(23+2.2g)随机分为空白对照组(n=20)和病毒基因注射转染组(n=20),进行研究。结果：Western blot显示病毒基因转染心肌后在第2周开始表达，并在第4周表达最高，其后可获得稳定且持续表达，而对照组则没有周期素A2表达(p<0.0001)。同时，肝、肺、肾中周期素A2水平相比于对照组没有差异，提示9型腺相关病毒对于心肌转染的较好的靶向性。心肌中增殖细胞核抗原在周期素A2转染后表达升高，而磷酸组蛋白H3的表达则没有明显差异，提示周期素A2促进DNA合成，但是没有明显的促进细胞有丝分裂作用。增殖相关蛋白PCNA,H3P,Ki-67在肝、肺、肾中的表达相比于对照组没有明显差异。免疫组化、免疫荧光显示周期素A2在转染心肌后主要位于心肌细胞胞浆中，而不存在核内聚集现象。结论：9型腺相关病毒介导周期素A2可以高效且靶向性转染C57小鼠心肌，并能促进心肌细胞DNA的合成，具有可行性。同时，较高靶向性使得周期素A2在心肌中特异性表达，而对其他组织器官并无过度增殖的影响，具有安全性。