大鼠骨髓间充质干细胞在四氯化碳慢性肝损伤形成过程中的作用

摘要

目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)在四氯化碳慢性肝损伤形成过程中的作用,明确其在慢性肝损伤早期的地位.方法:采用全骨髓贴壁法分离雄性wista大鼠原代骨髓间充质干细胞,常规培养,传3代细胞用于流式细胞仪和成脂肪细胞诱导以鉴定干细胞特性.结果:全骨髓贴壁法分离的MSC高表达CD90、CD29、CD44，低表达CD34和CDllb,成脂诱导2周油红染色可见大量脂滴。造模4周后，血清生化检测指标可见CC14组血清ALT(187.30±29.56)和AST ( 343.13±44.31)水平明显高于正常组(49.46±3.93; 125.89±8.09) (P<0.01)，细胞移植组增高血清ALT ( 223.92±35.17)和AST (390.44±52.26)水平(P<0.05)。血清总胆红素水平CC14组(4.97±1.03)较正常组(2.81士0.30)明显升高(P<0.01)，细胞移植组较CC14组(3.73±1.23)有所降低(P<0.01)。HE染色观察可见CC14组肝细胞肿大，胞浆松散，呈大泡型脂肪变性，呈现局灶性，病灶间可见少量正常肝组织，细胞移植组较CC14组脂肪变加重，正常组织面积减少。天狼猩红染色显示CC14组没有假小叶形成，细胞移植组可见少量假小叶形成。ELISA检测结果白介素10含量CC14组(766.25 ±92.20 pg/ml)较正常组(572.80±99.47pg/ml)升高(P<0.01)，细胞移植组(923.67±143.90 pg/ml)较CC14组更高(P<0.05 )。肿瘤坏死因子“含量CC14组( 206.61±61.52 pg/ml)较正常组(148.11±32.27 pglml)升高(P<0.05)，细胞移植组(280.65±73.23pg/ml)较CC14组升高(P<0.05)。结论：四氯化碳慢性肝损伤早期进行MSC移植可加重大鼠肝损伤，并促进肝纤维化的形成，其机制与促进肝脏炎症反应有关。